啤酒废酵母中RNA提取方法的研究

摘要

我国的啤酒生产和消费已连续六年居于世界首位。2007年年产啤酒3515万吨，产生啤酒废酵母约60万吨。作为啤酒生产的下脚料——啤酒废酵母中含有丰富的营养物质，其中RNA含量达6％～8％，是生产RNA的较好原料。对啤酒废酵母的合理利用既可以为啤酒企业创造良好的经济效益，提高入世后的企业竞争力，也有利于保护环境。 本实验即是以啤酒废酵母为原料提取RNA，主要研究了盐法、单一酶法(分别是中性蛋白酶法和β-葡聚糖酶法)和双酶法(中性蛋白酶和β-葡聚糖酶共同作用)的最佳提取工艺，其中酶法提取酵母中RNA文献少有报道。同时以活性干酵母做对比实验，主要是为规模化生产RNA提供可选择的原料。 结果表明：啤酒废酵母盐法提取RNA优化后最佳条件为：温度100℃，原始pH(5.89～5.95)，NaCl浓度9％，作用时间7h，RNA得率6.28％，纯度91.23％；酶法中中性蛋白酶法较好，最佳提取条件为：温度55℃，pH值6.5，酶用量3％，作用1h，RNA得率3.24％，纯度91.67％。在实际生产中，若综合能源等各方面因素，两种方法均可选。根据实验结果，活性干酵母可作为生产RNA的原料补充。

目录

文摘

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第1章前言

1.1酵母菌(Yeast)概述

1.2酵母细胞壁的主要组成成份

1.3啤酒废酵母

1.3.1啤酒酵母

1.3.2啤酒废酵母的回收与综合利用

1.4活性干酵母

1.5核酸

1.5.1核酸的成分、结构及性质

1.5.2核糖核酸的应用

1.5.3我国核酸开发应用概况

1.6啤酒废酵母中RNA提取的研究现状

1.7本研究的目的与意义

第2章材料与方法

2.1材料与试剂

2.2主要仪器和设备

2.3测定方法

2.4 RNA的提取方法

2.4.1 RNA提取机理

2.4.2 工艺流程

2.4.3洗涤、过筛、分离

2.4.4预处理

2.4.5啤酒废酵母中RNA提取条件的确定

2.4.6加热灭酶

2.4.7离心分离

2.4.8除蛋白质

2.4.9沉淀

2.4.10干燥

2.5效益分析

2.5.1盐法提取RNA的效益分析

2.5.2中性蛋白酶法提取RNA的效益分析

第3章结果与讨论

3.1处理后泥状酵母的检测结果

3.2 RNA提取条件的确定

3.2.1盐法提取啤酒废酵母中RNA条件的确定

3.2.2中性蛋白酶法提取啤酒废酵母中RNA

3.2.3 β-葡聚糖酶法提取啤酒废酵母中RNA

3.2.4双酶法提取啤酒废酵母中RNA

3.2.5活性干酵母对比实验

3.3定磷法标准曲线

3.4本章小结

结论

参考文献

致谢