利用RAPD和AFLP分子标记进行黄瓜橘红芯基因分析

摘要

黄瓜橘红芯品种为黑龙江省农科院园艺分院研究育成的一种黄瓜新品种，该品种黄瓜芯色为橘红色，与普通黄瓜品种相比，口感非常甜脆。 本研究以黄瓜橘红芯新品种与黄瓜普通芯品种为材料，利用RAPD和AFLP标记技术，对黄瓜橘红芯基因进行分析。同时通过田间植株性状进行遗传对比研究，对得到的RAPD及AFLP标记进行DNA测序。 在筛选的200条RAPD随机引物中，找到1条引物S5160-589所扩增出来的多态性片段，经验证，该标记与橘红芯基因存在着共生长关系。 利用AFLP标记技术对250对引物组合进行PCR扩增筛选。其中引物对P28M60-56所扩增出来的多态性片段在两品种间验证表明，该标记与橘红芯基因存在着共生长关系。 对得到的RAPD和AFLP标记进行基因克隆并测序，从而得到与黄瓜橘红芯性状基因共生长的DNA标记片段。通过RAPD和AFLP标记相结合，同时通过田间植株遗传验证，发现了黄瓜橘红芯标记为简单基因遗传的隐性遗传。

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第1章绪论

1.1国内外黄瓜芯色及其他黄瓜品种的研究现状

1.2分子标记的研究与进展情况

1.2.1形态学标记

1.2.2细胞学标记

1.2.3蛋白质标记

1.2.4 DNA分子标记

1.3黄瓜分子标记研究进展

1.4研究的目的与意义

第2章材料与方法

2.1实验材料

2.2实验方法

2.2.1基因组DNA的提取

2.2.2与橘红芯性状连锁的RAPD标记的筛选

2.2.3与橘红芯性状连锁的AFLP标记的筛选

2.2.4目标片段的测序

第3章结果与分析

3.1田间收获的黄瓜品种分离情况

3.2黄瓜基因组DNA提取的质量

3.3与橘红芯性状连锁的RAPD标记的筛选

3.4与橘红芯性状连锁的AFLP标记的筛选

3.4.1预扩增的检测

3.4.2多态性AFLP引物的筛选分析及特异片段的筛选

3.5测序结果

3.5.1特异片段S5160-589扩增的测序结果

3.5.2特异片段P28M60-156扩增的测序结果

第4章讨论

结 论

参考文献

致谢