乐果、毒死蜱两种有机磷农药对尾柱虫的毒性效应研究

摘要

近些年来，随着农业的进步，农药的应用越来越广泛，农药的使用在给农业带来经济效益的同时，也严重影响了农业生态环境。农药污染破坏生态环境，影响生物的生存和人类的健康，这些不利影响是不可逆的。因此，农药毒性是毒理学研究领域的一个热点。原生动物作为单细胞动物，有些种类可以作为指示生物。本实验所用药品为乐果（Dimethoate Pesticide）、毒死蜱（Pesticide Chlorpyrifos）；所用到的原生动物为尾柱虫（Urostyla sp.）。具体研究内容如下：
　　本研究以尾柱虫（Urostyla sp.）为实验对象，分别测定两种有机磷农药乐果、毒死蜱对尾柱虫的24h半致死浓度。并以此半致死浓度为基础，测定出这两种有机磷农药对尾柱虫无性二分裂速度（次/日）产生影响时的各自最低有效浓度。并利用透射电镜，对在此浓度培养液下培养的尾柱虫与正常对照组的虫体的细胞亚显微结构做了比较观察。以期揭示尾柱虫受到两种农药毒害初期，即无性二分裂速度刚发生变化时细胞亚显微结构的变化。实验方法如下：
　　测定虫体分裂速度（次/日）的方法：将单克隆培养的虫体放入玻璃凹坑中加定量食物培养（每个凹坑放1只虫子），每24小时解剖镜下观察一次虫体的分裂状况，记录每个凹坑中虫体个数，由此确定该凹坑中虫体的分裂次数。之后，留下一只状态最好的虫子，其他的将被用吸管吸走，然后清理水体中的代谢废物、加入新鲜培养液和定量食物继续培养。每168小时为一个周期。配制梯度浓度的乐果、毒死蜱培养液，用于培养尾柱虫，测定各浓度下培养虫体每日分裂次数。实验分为实验组和对照组，以30个凹坑为大样本。然后利用SPSS软件，进行方差分析，找出实验组与对照组（正常虫体）每日二分裂次数呈显著性差异的最低有效的乐果与毒死蜱浓度范围。
　　利用透射电镜技术，观察实验组和对照组的虫体细胞内部结构，重点观察的有：线粒体，细胞核，细胞质等。
　　结果如下：
　　1.半致死浓度：乐果对尾柱虫24h的 LC50=0.625mg/L，毒死蜱对尾柱虫24h的LC50=0.029mg/L。在急性毒性作用下，尾柱虫对乐果的耐受性比毒死蜱高。
　　2.乐果对尾柱虫无性二分裂速度产生影响的最低有效浓度范围是：0.264~0.275mg/L；毒死蜱对尾柱虫的无性二分裂速度产生影响的浓度范围是：0.0075~0.0093mg/L。乐果、毒死蜱对尾柱虫在168h内的慢性毒性作用表现为抑制虫体的分裂速度，本实验获得的浓度为最低有效浓度，远低于国家污水排放标准——有机磷农药排放最高限值为0.5mg/L。
　　3.透射电镜的亚显微结构观察结果显示，在影响虫体无性二分裂速度的两种药品的最低有效浓度下培养的虫体，虫体细胞内部的小核表现出核膜变形不完整，染色质凝集；大核核膜出现断裂，染色质聚缩，核仁数量减少的现象；线粒体表现为双层膜结构模糊不清，内部嵴结构不清晰。
　　本文揭示了尾柱虫对微量毒素的细微生理反应。测定了影响尾柱虫无性二分裂速度的乐果和毒死蜱浓度低于其半致死浓度。以期对两种有机磷农药的合理使用及其安全评价方面积累更安全、科学、可借鉴的客观数据资料，作为对原指标体系的补充和参考。

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中文摘要

英文摘要

第1章 绪 论

1.1原生动物概述

1.2原生动物的细胞周期

1.3有机磷农药概述

1.4乐果、毒死蜱两种有机磷农药的毒理研究现状

1.5本研究的目的及意义

1.6技术路线

第2章 材料与方法

2.1尾柱虫采集与培养

2.2实验仪器与器具

2.3实验药品与试剂

2.4实验方法

第3章 实验结果

3.1乐果、毒死蜱对尾柱虫半致死浓度的确定

3.2乐果、毒死蜱影响尾柱虫分裂次数浓度的确定

3.3乐果、毒死蜱最低有效浓度对尾柱虫产生影响的透射电镜观察结果

第4章 讨论

4.1乐果、毒死蜱对尾柱虫的24h半致死浓度

4.2乐果、毒死蜱最低有效浓度对尾柱虫分裂次数的影响

4.3乐果、毒死蜱对尾柱24h半致死浓度与其影响分裂次数最低有效浓度地比较

4.4对照组虫体细胞亚显微结构与乐果组、毒死蜱组虫体细胞亚显微结构的比较

结论

参考文献

图版I

图版II

图版III

图版IV

图版说明

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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