小麦NL26-3C杀配子染色体单体附加系的miRNA高通量测序研究

摘要

来自山羊草属的某些染色体，在单体附加到不同基因型的普通小麦中时，具有完全或不完全的杀配子作用，在不完全杀配子作用下，可高频率诱导各种类型的染色体结构变异，在小麦遗传育种中发挥着重要的作用。但是杀配子染色体的分子作用机制至今还不清楚。
　　本研究创制NL26-3C杀配子染色体单体附加系材料，对NL26与NL26-3C单体附加系的花药组织进行miRNA高通量测序，以TaqMan检测技术验证高通量测序的结果。筛出与杀配子作用相关的miRNA，为揭示杀配子染色体的分子作用机制奠定基础。主要研究结果如下：
　　1.以NL26为母本，NL26-3C杀配子染色体二体附加系为父本进行杂交，获得F1代材料。以3C特异SCAR标记对F1材料进行鉴定，证明了其含有3C杀配子染色体。对F1代材料根尖进行染色体制片观察，结果显示，染色体数为43条，确定杂交获得的F1代材料为NL26-3C杀配子染色体单体附加系。
　　2.对NL26和NL26-3C单体附加系花药进行高通量测序，获得来自77个家族的133个已知miRNA，4个新miRNA。其中有9个miRNA在NL26-3C单体中表达显著高于NL26，11个miRNA在NL26中表达显著高于NL26-3C。对差异表达miRNA进行了靶基因功能预测。结果显示，这些miRNA主要行使分子结合、酶的催化等功能，参与了细胞形成、细胞代谢等过程。
　　3.选取差异表达的miR9657b-3p，应用TaqMan技术检测它在NL26和NL26-3C中的表达量。结果显示，miR9657b-3p在NL26-3C中的表达显著高于NL26，与高通量测序分析结果一致。确定miR9657b-3p为研究杀配子染色体分子机制的候选miRNA。

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第1章 绪论

1.1杀配子染色体的概况

1.2 植物miRNA的研究现状

1.3研究的目的及意义

第2章 NL26-3C单体附加系的创制与鉴定

2.1引言

2.2实验材料

2.3实验方法

2.4实验结果

2.5本章小结

第3章 NL26-3C单体附加系的高通量测序分析

3.1引言

3.2 实验材料

3.3实验方法

3.4实验结果与分析

3.5本章小结

第4章 讨 论

结论

参考文献

附录

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攻读硕士学位期间所发表的学术论文

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