针灸预刺激对AD模型大鼠学习记忆能力及自由基GSH-PX、MDA影响的研究

摘要

目的：阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)是一种严重危害老年人身心健康的重大疾病之一。以记忆力减退、认知功能障碍为特征的中枢神经系统变性疾病。人口老化越严重，痴呆的患病几率就越多，家庭和社会的负担也就越大。据统计，全世界65岁以上的老龄人群中约10％患有痴呆。老年痴呆已逐渐取代卒中，位据神经科疾病的第一位。人类进入21世纪所面临的人口老龄化，使老年痴呆成为国内外医学研究的一项重要课题。由于AD病程较长，病情较重，且中晚期治疗效果不佳，治疗花费大。因此，对AD的研究转向早期干预。针灸具有早期性，功能性及良性双向调整的特点，而贯穿中医药针灸学的“治未病”思想适用于疾病前期的诊断和治疗，应在AD的防治中发挥重要作用，而目前报道关于针灸防治AD的临床和实验研究却很少。为进一步探讨针灸对AD的早期预防和治疗作用，本课题在脑室内注射Aβ25-35建立AD大鼠模型，在模型制作前针刺和艾灸大鼠百会和肾俞穴。通过酶联免疫吸附(ELISA)实验技术，分析预针灸对自由基GSH—PX及MDA含量的检测，比较艾灸、电针、电针+艾灸三种不同干预措施对比疗效，为针灸防治AD在临床上的应用提供实验依据。 方法：将140只大鼠分别进行Morris水迷宫测试，筛选出120只大鼠，分别随机分为正常组、假手术组、模型组、预艾灸组、预电针组，预电针艾灸组，一共6组，每组各20只。将凝集状态的Aβ25-35立体定向注入大鼠双侧脑室内建立痴呆大鼠模型。预艾灸组即对大鼠造模前先给予艾灸刺激，选取大鼠“百会”(顶骨正中)、“肾俞”(第2腰椎下两旁)穴上方2-3cm处悬灸，使穴位表皮温度在43℃±1℃，持续10分钟，每日1次，5日为1疗程，疗程间休息2日，共3个疗程。施灸结束当日即开始给大鼠脑内注射Aβ25-35。预电针组即对大鼠先施于电针刺激。取穴同C组，百会向前平刺3-5mm，肾俞穴稍向内斜刺5mm，接上海产G6805电针治疗仪，选用连续波、频率2Hz，以针柄轻微抖动为度，留针20min，每日1次，5日为1疗程，疗程间休息2日，共3个疗程。电针结束当日即开始给大鼠脑室内注射Aβ25-35。预电针加灸组即对大鼠先施于D组与E组相同治疗方法。治疗结束当日即开始给大鼠脑室内注射Aβ25-35。Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力。通过酶联免疫吸附(ELISA)实验技术，分析预针灸对自由基GSH—PX及MDA含量的影响。 结果：(1)从Morris水迷宫实验中我们观察到，各组大鼠均随着训练次数增加，潜伏期越来越短，说明各组大鼠在每次游泳训练中，对于寻找平台均有一定的学习记忆能力，但其学习记忆能力有很大差异。正常组与假手术组比较，无显著性差异，说明手术损伤对大鼠的学习记忆能力无显著性影响。模型组大鼠Morris水迷宫潜伏期5天内基本保持恒定水平，穿过原平台位置的次数较少，与正常组比较有非常显著性差异，说明模型组大鼠学习记忆严重受损，造模成功。各治疗组大鼠逃避潜伏期明显缩短，穿过原平台位置的次数明显增多，游泳路径也逐渐缩短，且预电针加灸组优于预艾灸组和预电针组。表明针灸治疗可改善和提高AD模型大鼠的学习记忆能力(2)模型组MDA含量显著增高，GSH—PX含量显著降低，与正常组比较均有非常显著性差异(P＜0.01)。假手术组MDA含量、GSH—PX活性含量与正常组比较无差异。预电针加灸组MDA含量、GSH—PX活性含量与模型组比较有非常显著性差异(P＜0.01)，预艾灸组、预电针组MDA含量、GSH—PX活性含量与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)。预电针加灸组MDA．含量与预艾灸组、预电针组比较有非常显著性差异(P＜0.01)，预电针加灸组GSH—PX活性含量与预艾灸组、预电针组比较有显著性差异(P＜0.05)。实验结果表明，预艾灸组、预电针组和预电针加灸组均能不同程度降低大脑海马中MDA含量，提高GSH—PX活性含量，尤其预电针加灸组效果最好。 结论：本课题在脑室内注射Aβ25-35成功复制了老年痴呆动物模型。益肾调督法可以清除自由基，提高机体的抗氧化能力，减轻脑内自由基对神经元的损伤，改善AD模型大鼠的学习记忆能力从而起到延缓脑老化的作用。“益肾调督”是从整体调节出发，为针灸防治AD在临床上的应用提供实验依据。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

第一部分 实验研究

实验一 针灸预刺激对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响

实验二 针灸预刺激对阿尔茨海默病模型大鼠自由基的影响

第二部分 结论与探讨

一、中医学对老年痴呆的认识

二、现代医学对老年痴呆病因病机的认识

三、动物模型的评价

四、选穴依据

五、结语

参考文献

第四部分文献综述：针灸防治老年痴呆的临床研究概况

致谢