小鼠乳腺中FGF7、FGF10及其受体的表达与作用

摘要

在哺乳动物的生殖周期中，乳腺上皮经历了反复生长、分化以及退化的循环。乳腺的发育和泌乳受多种激素和细胞因子调节。与刺激乳腺发育直接有关的全身激素主要有三种：雌激素、孕酮以及催乳素。这些全身性的激素可能是通过影响成纤维细胞生长因子(FGFs)这样的局部组织调节物来调节细胞功能。全部的FGFs都是广谱的有丝分裂原，作用于外胚层、内胚层和间充质来源的细胞。在乳腺发育过程中，KGFR以及它的基质配体-FGF7和FGF10对于乳腺上皮细胞的增殖和形态发生起着重要作用。本研究主要以小鼠为实验材料，通过体外和体内实验，系统研究FGF7、FGF10及KGFR在哺乳动物乳腺发育、泌乳及退化过程中表达定位的动态变化，揭示FGF7、FGF10及KGFR表达变化与乳腺发育及泌乳功能间的对应关系，阐明FGF7、FGF10在乳腺发育、泌乳及退化过程中的功能以及乳腺发育激素对不同时期乳腺FGF7、FGF10及KGFR表达的影响。结果如下： (1)FGF7有几个显著高表达的点，分别是青春期20d、青春期40d、妊娠初期、妊娠中期、泌乳初期、退化期初期以及退化末期。其中FGF7在退化期4d升高达到最高值。FGF10显著高表达的时点，分别是青春期20d、青春期35d、妊娠4d。在泌乳期泌乳4d后，表达量一直较高，其中显著高表达的点是泌乳10d。进入退化期后，在退化4d和退化7d时FGF10显著下降，然后FGF10水平上升并一直维持高水平表达。KGFR在青春期显著高表达的点是青春期20d、青春期60d。进入妊娠期后，KGFR水平先略微下降，在妊娠10d后开始显著上升，上升到妊娠16d后略有下降。进入泌乳期后，在泌乳4d时KGFR表达达到最高值，在泌乳10d后KGFR一直下降，直至进入退化期。KGFR在退化期19d开始显著上升。偏相关分析结果表明，在泌乳期FGF7以及FGF10均与KGFR的表达有相关性。 (2)FGF7主要定位于乳腺导管上皮细胞与乳腺腺泡上皮细胞基质。FGF10体现了一种与FGF7相同的定位模式。KGFR主要定位于乳腺导管上皮细胞以及乳腺腺泡上皮细胞，在乳腺发育的个别时期在细胞外基质中有弱表达。 (3)FGF7能促进小鼠乳腺腺泡上皮细胞的增殖。FGF10除了能促进小鼠乳腺腺泡上皮细胞的增殖，还与乳腺脂肪组织的形成有关。 (4)除青春期和妊娠期外，添加FGF7和FGF10的处理均能显著诱导乳腺腺泡上皮细胞产生KGFR。 (5)FGF7与FGF10均能降低乳腺腺泡上皮细胞的凋亡。 (6)17β-雌二醇能引起小鼠乳腺中FGF7表达上调；孕酮对小鼠乳腺中的FGF7表达没有影响;在小鼠乳腺发育的妊娠期与泌乳期，催乳素能引起FGF7表达显著上调。17β-雌二醇能引起小鼠乳腺中的FGF10表达上调；在小鼠乳腺发育的青春期，孕酮和催乳素能显著减少FGF10的表达：在小鼠乳腺发育的妊娠期，催乳素能显著增加FGF10的表达。当雌激素在体内所占比例比较高的时候，会减少KGFR的表达；而雌激素在体内所占比例比较低的时候，反而会增加KGFR的表达。低浓度孕酮使KGFR的表达增加，高浓度孕酮对于KGFR的表达没有影响。在小鼠乳腺发育的妊娠期以及泌乳期，催乳素能显著升高KGFR的表达。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1小鼠的乳腺发育和泌乳

1.1.1小鼠乳腺的发育

1.1.2乳腺上皮细胞与泌乳的关系

1.1.3乳腺发育中的细胞凋亡

1.2 FGFs对乳腺的作用

1.2.1 FGFs及其受体

1.2.2与乳腺发育有关的FGF

1.3乳房发育激素对乳腺的作用

1.4本研究的目的与意义

2材料和方法

2.1小鼠乳腺发育过程中FGF7、FGF10及KGFR的表达定位

2.1.1材料和仪器

2.1.2实验步骤

2.2 FGF7、FGF10对小鼠乳腺发育的影响

2.2.1 FGF7、FGF10对小鼠乳腺形态发育的影响

2.2.2 FGF7、FGF10对小鼠乳腺中KGFR表达的影响

2.2.3 FGF7、FGF10对小鼠乳腺细胞凋亡的影响

2.3乳腺发育激素对乳腺中FGF7、FGF10及KGFR表达的影响

2.3.1材料和仪器

2.3.2实验步骤

2.4数据处理

3 结果

3.1小鼠乳腺发育过程中FGF7、FGF10及KGFR的表达定位

3.1.1青春期小鼠乳腺中FGF7、FGF10及KGFR的表达定位

3.1.2妊娠期小鼠乳腺中FGF7、FGF10及KGFR的表达定位

3.1.3泌乳期小鼠乳腺中FGF7、FGF10及KGFR的表达定位

3.1.4退化期小鼠乳腺中FGF7、FGF10及KGFR的表达定位

3.1.5小鼠乳腺中FGF7、FGF10及KGFR的表达变化趋势

3.2 FGF7、FGF10对小鼠乳腺发育的影响

3.2.1 FGF7、FGF10对小鼠乳腺形态发育的影响

3.2.2 FGF7、FGF10对小鼠乳腺中KGFR表达的影响

3.2.3 FGF7、FGF10对小鼠乳腺细胞凋亡的影响

3.3乳腺发育激素对乳腺中FGF7、FGF10及KGFR表达的影响

3.3.1乳腺发育激素对青春期乳腺中FGF7、FGF10及KGFR表达的影响

3.3.2乳腺发育激素对妊娠期乳腺中FGF7、FGF10及KGFR表达的影响

3.3.3乳腺发育激素对泌乳期乳腺中FGF7、FGF10及KGFR表达的影响

3.3.4乳腺发育激素对退化期乳腺中FGF7、FGF10及KGFR表达的影响

3.3.5乳腺发育激素对强制退化期乳腺中FGF7、FGF10及KGFR表达的影响

4讨论

4.1小鼠乳腺发育过程中FGF7、FGF10及KGFR的表达定位

4.1.1小鼠乳腺中FGF7的表达定位

4.1.2小鼠乳腺中FGF10的表达定位

4.1.3小鼠乳腺中KGFR的表达定位

4.2 FGF7、FGF10对小鼠乳腺发育的影响

4.2.1 FGF7、FGF10对小鼠乳腺形态发育的影响

4.2.2 FGF7、FGF10对小鼠乳腺中KGFR表达的影响

4.2.3 FGF7、FGF10对小鼠乳腺细胞凋亡的影响

4.3乳腺发育激素对乳腺中FGF7、FGF10及KGFR表达的影响

4.3.1乳腺发育激素对乳腺中FGF7表达的影响

4.3.2乳腺发育激素对乳腺中FGF10表达的影响

4.3.3乳腺发育激素对乳腺中KGFR表达的影响

5结论

致谢

参考文献

攻读博士学位期间发表的论文