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维生素E缺乏对雏鸡红细胞膜的影响

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1引言

1.1红细胞的氧化与抗氧化系统

1.1.1红细胞抗氧化系统

1.1.2红细胞氧化系统

1.2维生素E与红细胞溶血

1.3维生素E与红细胞免疫

1.4维生素E与红细膜

1.4.1维生素E与红细胞膜蛋白

1.4.2维生素E与红细胞膜脂质

1.4.3维生素E与红细胞膜SA

1.4.4维生素E与红细胞膜流动性

1.4.5维生素E与红细胞膜离子通道

1.5研究的目的和意义

2材料与方法

2.1主要仪器和试剂

2.1.1主要仪器

2.1.2主要试剂

2.2实验动物及处理

2.3检测项目与方法

2.3.1样品采集与处理

2.3.2红细胞维生素E和Hb含量的测定

2.3.3红细胞膜蛋白SDS-PAGE分析

2.3.4红细胞膜磷脂组分分析

2.3.5红细胞膜SA含量测定

2.3.6红细胞膜流动性的检测

2.3.7红细胞膜ATPase活性测定

2.3.8红细胞的氧化与抗氧化性能检测

2.4实验数据处理与统计

3结果与分析

3.1维生素E缺乏雏鸡模型的建立

3.2红细胞维生素E和Hb含量的测定

3.3红细胞膜蛋白组分分析

3.3.1 SDS-PAGE鉴定和分析

3.3.2标准蛋白相对迁移率

3.3.3红细胞膜各蛋白组分分子量

3.3.4红细胞膜蛋白组分分析

3.4红细胞膜磷脂组分分析

3.5红细胞膜SA含量测定结果

3.6红细胞膜流动性检测结果

3.7红细胞膜ATPase活性测定结果

3.8红细胞抗氧化性能及膜NO含量测定结果

3.9红细胞Hb含量及G-6-PD活性测定结果

4讨论

4.1维生素E缺乏雏鸡模型建立

4.2维生素E缺乏对红细胞膜蛋白组分的影响

4.3维生素E缺乏对红细胞膜磷脂组分的影响

4.4维生素E缺乏对红细胞膜sA含量的影响

4.5维生素E缺乏对红细胞膜流动性的影响

4.6维生素E缺乏对红细胞膜ATPase活性的影响

4.7维生素E缺乏对红细胞抗氧化性能及膜NO含量的影响

4.7.1维生素E缺乏对红细胞抗氧化性能的影响

4.7.2维生素E缺乏对红细胞膜NO含量的影响

4.8维生素E缺乏对红细胞Hb含量及G-6-PD活性的影响

5结论

致谢

参考文献

攻读硕士期间发表的学术论文

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摘要

以一日龄海兰蛋鸡为试验动物,用低维生素E(VE)和添加不饱和脂肪酸的日粮饲喂雏鸡,建立VE缺乏雏鸡模型,以雏鸡红细胞为研究对象,采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效薄层层析和荧光偏振等方法对红细胞膜蛋白、磷脂组分与含量、唾液酸(SA)含量、膜ATP酶活性、膜流动性、红细胞及红细胞膜抗氧化性能、红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性和血红蛋白(Hb)含量进行检测,研究结果表明: 1.维生素E缺乏雏鸡红细胞膜蛋白组分发生变化,蛋白区带Ⅰ、Ⅱ百分含量升高,带Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ百分含量降低,组间差异显著或极显著(P<0.05,P<0.01),带Ⅳ无显著变化。 2.维生素E缺乏雏鸡红细胞膜磷脂组分中磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)含量低于对照组,神经鞘磷脂(SM)、磷脂酰丝氨酸(PS)含量高于对照组,组间差异显著或极显著(P<0.05,P<0.01)。 3.维生素E缺乏雏鸡红细胞膜SA含量降低,组间差异显著或极显著(P<0.05,P<0.01)。 4.维生素E缺乏雏鸡红细胞膜ATPase活性和膜流动性降低,组间差异显著或极显著。(P<0.05,P<0.01)。 5.维生素E缺乏雏鸡红细胞超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)活性降低;丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量升高;红细胞膜NO含量增加,组间差异极显著(P<0.01)。 6.维生素E缺乏雏鸡红细胞Hb含量及G-6-PD活性降低,组间差异极显著(P<0.01)。 上述结果说明,VE缺乏雏鸡红细胞膜结构发生改变,脂质过氧化作用增强,抗氧化能力降低,膜代谢和功能异常。该研究成果可为揭示VE缺乏雏鸡红细胞损伤及红细胞免疫抑制机理提供理论依据。

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