硒缺乏致鸡免疫抑制机制的研究

摘要

硒作为动物机体必需的微量元素，是机体自由基的清除剂，与其他抗氧化物质共同构成机体内抗氧化防御系统，以维持体内自由基动态平衡。世界上许多国家都存在严重的缺硒地区，而我国又是严重缺硒国家之一。硒缺乏症是一种危害多种动物的世界性疾病，大量研究发现，动物缺硒可以引起鸡渗出性素质、胰腺纤维变性和白肌病，猪桑椹心病、肝坏死以及牛、羊肌肉营养不良等各种疾病，给养殖业造成巨大的经济损失。目前国内外学者对畜禽硒缺乏症的临床症状、剖检变化、流行病学、致病原因和发病机理等方面进行了大量的研究，但是硒缺乏致鸡免疫抑制机制的研究较少。本试验以硒含量为0.032 mg/kg 的日粮饲喂鸡复制硒缺乏动物模型，分别于30、45、60 及75 日龄剖杀采样，通过对鸡免疫器官病理学观察，免疫器官及血清NO 代谢和抗氧化功能、血清中细胞因子含量、淋巴细胞生长周期和DNA损伤以及免疫器官凋亡相关基因（Fas，Caspase-3）mRNA 表达水平的检测，初步揭示了硒缺乏致鸡免疫抑制的机制。结果表明：
　　 1．通过病理学观察和TUNEL 法检测，表明硒缺乏可引起鸡免疫器官发生凋亡、变性、坏死等显微和超微结构变化，是硒缺乏引起免疫抑制的形态学基础。
　　 2．采用放免法检测鸡血清中细胞因子含量，结果证实硒缺乏可引起鸡血清中IL-1β和IL-2含量降低，TNF 含量升高，导致机体免疫功能降低。
　　 3．通过对鸡免疫器官及血清抗氧化功能和NO 代谢的检测，证实硒缺乏可引起鸡免疫器官及血清GSH-Px、SOD 活性和T-AOC 能力降低，MDA、NO 含量和NOS 活性升高，揭示氧化胁迫是硒缺乏诱发鸡免疫器官淋巴细胞凋亡的机制之一。
　　 4．采用碱性SCGE和DNA Ladder 分析等方法检测了硒缺乏对鸡免疫器官淋巴细胞DNA的损伤效应，结果显示硒缺乏可引起鸡淋巴细胞DNA 损伤，表明硒缺乏能够通过损伤免疫细胞DNA引起机体的免疫抑制。
　　 5．硒缺乏可引起鸡免疫器官Fas、Caspase-3 mRNA 的表达量增加，细胞凋亡增多，表明硒缺乏可通过Fas 途径诱导淋巴细胞的凋亡。
　　 本试验从免疫器官形态结构、氧化胁迫、DNA 损伤、细胞因子、细胞凋亡和凋亡相关基因表达等角度着手，初步揭示了硒缺乏致鸡免疫抑制的机制，为硒缺乏病的诊断和治疗提供科学的理论基础，为比较医学提供借鉴。