蓝果忍冬(Lonicera caerulea L.)组培快繁技术的研究

摘要

组培工作者多次对单一品系的蓝果忍冬进行了研究，结果存在差异，并不完全相同，所以本试验于2012年11月底从东北农业大学设施工程中心蓝果忍冬资源圃采集选取了4个不同的蓝果忍冬品系进行研究，分别是来自俄罗斯的“蓓蕾”、“蓝鸟”（L.Kamtschatica Pojark.）和来自中国的“长白山1号”(L.caerulea var.edulis)、“阿尔泰1号”(L.caerulea var.altaica)。取冬萌芽为试验材料，筛选合适的外植体;采用不同的75％酒精、2％NaClO和0.1％HgCl2消毒剂组合和灭菌时间获得无菌材料;在WPM、MS、H、B5、N6、White常用培养基中筛选最适基础培养基;通过对6-BA、ZT、GA3不同激素组合配比，筛选生长培养基的有利激素;利用正交试验设计筛选有效的生根培养基;探索不同温度、相对空气湿度条件和基质对驯化和移栽的影响，研究来自不同地域不同品系，蓝果忍冬组培快繁技术的异同点，建立单个品系的组培快繁体系。主要研究结论如下: (1)外植体的筛选:不同地理区域的品系不存在明显的差异，不同品系的蓝果忍冬适合做组织培养的外植体部位，基本相同，均可采用茎尖（1.00cm左右）、茎段为外植体。其中，茎段可产生丛生芽，茎段（个）∶丛生芽（个）=1∶3或4，茎尖（个）∶丛生芽（个）=1∶1，茎段可通过丛生芽切割方式继续培养;其中“蓝鸟”（L.Kamtschatica Pojark.）茎段的培养效果的成活率明显低于其他三个品系，污染率较高，所以“蓝鸟”（L.Kamtschatica Pojark.）最好取茎尖为外植体。 (2)灭菌条件的筛选:不同地理区域间没有必然的联系，不同品系的蓝果忍冬同种外植体，所需要的灭菌条件并不完全相同，总体来说，蓝果忍冬茎尖外植体的最佳处理方法为:75％酒精(30s)→3次无菌水冲洗→0.1％氯化汞(6 min)→6次无菌水冲洗（每次不少于1 min）。 (3)基础培养基的选择:4个品系都可用WPM和MS做基础培养基，成活率明显高于其它培养基，“蓓蕾”、“蓝鸟”、“阿尔泰1号”WPM成活率较高于MS，所以选用WPM为基础培养基。其中“长白山1号”也可用MS培养基，与WPM培养基培养效果无显著差异。 (4)生长培养基的选择:1.0mg·L-16-BA对4个品系组培苗的增长均有显著影响，可有效的促进组培苗的生长，所以对于4个不同品系的蓝果忍冬来说，最佳的生长培养基为:WPM+1.0mg·L-16-BA。 (5)生根培养基的选择:IBA在生根环节中起到了促进作用，不同品系之间存在浓度差异。6-BA促进组培苗的生长，1.0mg/L为最适浓度，GA3对生根率的影响不是很大，因品系不同有差异。除“蓝鸟”外，其他三个品系1/2WPM的生根率高于1/4WPM。 “蓓蕾”的生根培养基为:1/2WPM+1.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1 IBA;“蓝鸟”的生根培养基:1/4WPM+1.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1 IBA+1.0mg·L-1 GA3;“长白山1号”的生根培养基:1/2WPM+1.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-1 IBA;“阿尔泰1号”的生根培养基:1/2 WPM+1.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1 IBA+0.5mg·L-1 GA3。 (6)驯化移栽条件的摸索:不同地域间的蓝果忍冬不存在明显的差异性，不同品系的驯化和移栽条件基本相同。“蓓蕾”、“阿尔泰1号”驯化的相对空气湿度为70％～80％，室温20℃;“蓝鸟”、“长白山1号”要求相对空气湿度80％，室温20℃。严格的控制温度和相对湿度是驯化和移栽过程中的首要条件，其次移栽时要注意冲洗培养基，以免遭致有害微生物的入侵，最后将已生根的组培苗移栽到草炭土∶沙=1∶1基质中，温度20℃，湿度为80％培养25d，可形成正常植株。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 蓝果忍冬的主要生物学特性

1．1．1 植物学特征

1．1．2 农艺特性

1．2 组培快繁技术

1．2．1 植物组织培养的概念

1．2．2 植物组织培养的发展简史

1．2．3 植物组织培养的原理、特性和应用

1．3 蓝果忍冬的国内外研究进展

1．3．1 国外蓝果忍冬的研究现状

1．3．2 我国蓝果忍冬的研究现状

1．4 研究的目的与意义

1．4．1 优化蓝果忍冬的快繁技术，确定不同品系适宜的组培条件

1．4．2 为黑龙江省的林业结构调整提供依据

1．5 研究内容和技术路线

1．5．1 研究内容

1．5．2 试验的创新点

2 材料与方法

2．1 材料采集与预处理

2．2 外植体的筛选

2．3 外植体灭菌方案的筛选

2．4 基础培养基的筛选

2．5 增长培养基的筛选

2．6 生根培养基的筛选

2．7 驯化和移栽

2．8 数据处理与分析

3 结果与分析

3．1 外植体的比较分析

3．1．1 “蓓蕾”组培外植体的选择

3．1．2 “蓝鸟”外植体的筛选

3．1．3 “长白山1号”外植体的筛选

3．1．4 “阿尔泰1号”外植体的筛选

3．1．5 小结

3．2 灭菌条件的比较分析

3．2．1 不同灭菌处理对“蓓蕾”组培苗的影响

3．2．2 不同灭菌处理对“蓝乌”组培苗的影响

3．2．3 不同灭菌处理对“长白山1号”组培苗的影响

3．2．4 不同灭菌处理对“阿尔泰1号”组培苗的影响

3．2．5 小结

3．3 基础培养基的比较分析

3．3．1 “蓓蕾”基础培养基的确定

3．3．2 “蓝鸟”基础培养基的确定

3．3．3 “长白山1号”基础培养基的确定

3．3．4 “阿尔泰1号”基础培养基的确定

3．3．5 小结

3．4 增长培养基的比较分析

3．4．1 “蓓蕾”增长培养基的确定

3．4．2 “蓝乌”增长培养基的确定

3．4．3 “长白山1号”增长培养基的确定

3．4．4 “阿尔泰1号”增长培养基的确定

3．4．5 小结

3．5 生根培养基的比较分析

3．5．1 “蓓蕾”生根培养基的确定

3．5．2 “蓝鸟”生根培养基的确定

3．5．3 “长白山1号”生根培养基的确定

3．5．4 “阿尔泰1号”生根培养基的确定

3．5．5 小结

3．6 驯化与移栽条件的比较分析

3．6．1 “蓓蕾”驯化与移栽

3．6．2 “蓝鸟”驯化与移栽

3．6．3 “长白山1号”驯化与移栽

3．6．4 “阿尔泰1号”驯化与移栽

3．6．5 小结

4 讨论

5 结论

致谢

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的学术论文