猪腹泻病例中几种常见病毒的感染调查

摘要

腹泻是猪临床上常见的疾病或症候之一，在哺乳仔猪会引起大量死亡，其发生会给猪场带来重大的经济损失。引起猪腹泻的原因众多，主要包括营养性、中毒性、细菌性、病毒性、寄生虫病等，其中病毒性病原是最为常见的致猪腹泻病因。 为了解当前临床腹泻病例中病毒感染情况，本研究主要利用PCR方法，对采集于2012年6月至2013年9月期间的303份临床上表现有腹泻症状的猪的小肠粪便样品中猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Porcine transmissiblegastroenteritis virus，TGEV)、猪伪狂犬病毒(Porcine pseudorabies virus，PRV)、猪轮状病毒(Porcine Rotavirus，PoRV)和猪细小病毒(Porcine parvovirus，PPV)的感染情况进行了检测。结果显示，以上病毒的单独感染以及混合感染均存在。在单独感染的病例中，PoRV最高，为39.93％(121/303);其次为PPV(84/303，27.72％);PEDV(55/303，18.16％)和PRV(17/303，5.61％)相对较低，而TGEV在本研究中的检出率为0(0/303);在两种病毒的混合感染中，PPV和PoRV混合感染的阳性率最高10.89％(33/303);其它依次为PEDV+PoRV:8.58％(26/303,); PRV+PoRV:4.29％(13/303),PEDV+PPV:3.63％(11/303), PRV+PPV:0.99％(3/303)，PEDV+PRV:0.66％(2/303);三种病毒同时感染的情况相对较少，在303例临床病例中，PEDV、PPV和PoRV同时阳性的病例有4例(1.32％)，PRV、PPV和PoRV同时阳性的病例有2例(0.66％)。对不同年龄段的猪群感染情况进行统计，在哺乳仔猪中PoRV阳性率最高为42.42％(70/165)，其他依次为PPV29.70％(49/165)，PEDV24.85％(41/165)，PRV4.85％(8/165)，TGEV0(0/165);保育-育肥猪中几种病毒的阳性率分别为:PoRV41.38％(48/116),PPV29.31％(34/116),PEDV11.21％(13/116),PRV7.76％(9/116)，TGEV0％(0/116);成年猪中PEDV阳性病例有1例(1/17，5.88％)，PRV/TGEV/PPV/PoRV感染均为0(0/17)，流产胎儿、死胎中PoRV(3/5，60％)，PPV(1/5，20％)，PEDV、PRV、TGEV均未检测到(0/5);对发病后送诊时间进行统计，PoRV在2012年9月检测阳性率最高为81.81％(9/11)，PRV在2012年9月最高(8/11，72.72％)，PPV在2013年3月最高检测阳性有21例(21/36，58.33％)，PEDV在2013年4月最高(14/30，46.67％);送检的来源于22个城市的样品中，18个城市样品PoRV感染发生，17个城市有PPV发生，10个城市有PEDV发生，8个城市有PRV发生，17个城市中发生病毒的混合感染。 通过本研究发现在我们所研究的猪腹泻病例中，感染的病毒性病原主要是PoRV和PPV;哺乳仔猪各病毒的感染率显著高于其他猪。研究结果为猪腹泻病例的病因学推断和防控提供了有益数据。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 PEDV及其诊断方法研究

1．1．1 PEDV概述

1．1．2 PEDV临床症状及病理变化

1．1．3 PEDV生物学特征

1．1．4 PEDV检测技术研究进展

1．2 TGEV及其诊断方法研究进展

1．2．1 TGEV概述

1．2．2 TGEV临床症状及病理变化

1．2．3 TGEV生物学特征

1．2．4 TGEV检测技术研究进展

1．3 PRV及其诊断方法研究进展

1．3．1 PRV概述

1．3．2 PRV临床症状及病理变化

1．3．3 PRV生物学特征

1．3．4 PRV检测技术研究进展

1．4 PoRV及其诊断方法研究进展

1．4．1 PoRV概述

1．4．2 PoRV临床症状及病理变化

1．4．3 PoRV生物学特征

1．4．4 PoRV检测技术研究进展

1．5 PPV及其诊断方法研究进展

1．5．1 PPV概述

1．5．2 PPV临床症状及病理变化

1．5．3 PPV生物学特征

1．5．4 PPV检测技术研究进展

1．6 研究的目的和意义

2 材料与方法

2．1 病毒

2．2 病料

2．3 试剂和仪器

2．4 引物

2．5 样品处理

2．6 DNA／RNA提取

2．7 PCR检测

2．8 电泳分析

2．9 病毒分离

2．10 电镜检测

2．11 宏基因组测序

2．11．1 引物

2．11．2 PCR扩增

2．11．3 PCR产物回收

2．11．4 连接与转化

2．11．5 重组质粒鉴定与测序

2．12 统计分析

3 结果

3．1 检测结果

3．2 阳性病例地域分布

3．3 不同猪群感染率

3．4 阳性病例的时间分布

3．5 临床症状的出现规律

3．6 病毒分离结果

3．7 宏基因组测序结果

4 讨论

5 结论

致谢

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的学术论文