声明
摘要
1引言
1．1传染性胰脏坏死病毒概述
1．1．1传染性胰脏坏死病毒流行性以及危害性
1．1．2传染性胰脏坏死病毒形态学特征
1．1．3传染性胰脏坏死病毒的基因组
1．1．4传染性胰脏坏死病毒的结构蛋白及其功能
1．1．5传染性胰脏坏死病毒分类学地位
1．2传染性胰脏坏死病的检测技术
1．2．1传统检测方法
1．2．2免疫学检测方法
1．2．3分子生物学检测方法
1．3环等温介导技术
1．3．1 LAMP概述
1．3．2 LAMP引物设计
1．3．3 LAMP扩增过程
1．3．4 LAMP产物判定方法
1．3．5 LAMP检测技术的评价
1．3．6 RT-LAMP检测技术在水产病害检测中应用
1．4本试验的目的及意义
2材料与方法
2．1实验材料
2．1．1细胞与毒株
2．1．2主要试剂及其配制
2．1．3主要实验仪器及设备
2．1．4引物
2．2实验方法
2．2．1 IPNV ChRtm213在CHSE-214细胞上的培养增殖
2．2．2 IPNV RNA的提取
2．2．3 RT-LAMP的体系
2．2．5 RT-LAMP温度的优化
2．2．6 RT-LAMP特异性检测
2．2．8 IPNV RT-LAMP检测临床样品试验
3结果与分析
3．1 IPNV的增殖
3．2．1最佳引物筛选结果
3．2．2 M92+浓度的优化结果
3．2．3 Betaine浓度的优化结果
3．2．4 dNTPs浓度的优化结果
3．3 RT-LAMP温度的优化结果
3．4 RT-LAMP特异性检测结果
3．6 RT-LAMP检测临床样品试验结果
4讨论
4．2．1 RT-LAMP引物的筛选
4．2．2 M92+浓度对RT-LAMP反应影响
4．2．3 Betaine浓度对RT-LAMP反应影响
4．2．4 dNTPs浓度对RT-LAMP反应影响
4．3 RT-LAMP反应温度对影响
4．6 RT-LAMP检测方法的临床应用
5结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
