花楸不同外植体的茎丛增生和愈伤组织诱导及植株再生

摘要

花楸(Sorbus pohuashanesis Hedl)是北方未被充分开发利用的优良的绿化树种.我们以幼胚、成熟胚、无菌茎丛的茎段、成年树的嫩叶和茎段等为外植体,首次通过不定芽和腋芽增殖途径建立了两套高效、可靠的组培再生系统.1、以花楸幼胚为外植体的研究表明:(1)取材时期和激素浓度配比是影响花楸幼胚丛生芽诱导效果的主要因素.(2)丛生芽最佳的增殖培养基为WPM+BA0.3~0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L,经继代培养一个幼胚可诱导出7~20个小茎丛;带有矮小不定芽的组织块可继代培养多次;(3)实验从改变培养基种类、降低激素浓度、增加琼脂浓度等方面采取有效的措施消除了茎丛增殖过程中的玻璃化现象;(4)当茎丛高达2~3cm时,转入生根培养基诱导生根,筛选出最佳的生根培养基为1/2MS+NAA0.3mg/L或IBA0.2mg/L;(5)移栽前将根系发达的生根苗打开瓶盖驯化3-5天,移入装有珍珠岩的塑料钵中炼苗一周,然后移栽到泥炭土和河沙以2:1混合的基质中,保持25±1℃,湿度>80﹪,成活率可达80﹪以上.2、以无菌茎丛的茎段为外植体,筛选出最佳的腋芽增殖培养基为:WPM+IBA(或NAA)0.05mg/L+BA1.0mg/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L,腋芽最大增殖倍数可达6.3、以花楸成熟胚为外植体,在添加BA、TDZ、IBA、2,4-D、NAA组成的不同激素组合的MS培养基上培养.4、以成年树嫩叶和茎段为外植体,在添加BA、TDZ、IBA、NAA、2,4-D组成的不同激素组合的MS培养基上培养,以诱导愈伤组织的结果表明:(1)以幼嫩的茎段为外植体时,从愈伤组织的诱导率、体积和生长状态综合考虑,得出生长素的效应大小为NAA>2,4-D>IBA,最佳激素种类组合为NAA1.0mg/L+BA0.5~3.0mg/L、2,4-D1.0mg/L+BA0.5~3.0mg/L或TDZ0.01~0.5mg/L;(2)以幼嫩的叶片为外植体时,虽然诱导率可达100﹪,但只是在切口处长小米粒大小的愈伤组织,生长素的诱导效应大小为2,4-D>NAA>IBA,最佳激素组合为2,4-D1.0mg/L+BA0.5~3.0mg/L;(3)无论以嫩叶还是茎段为外植体,将经初代培养诱导的愈伤组织转入增殖培养基,增殖效果都非常好,4周后愈伤组织长满培养瓶.

目录

文摘

英文文摘

1文献综述

1.1植物组织培养在离体扩繁中的应用与发展前景

1.2影响组织培养的主要因素

1.2.1外植体的选择

1.2.2培养基

1.2.3糖类

1.2.4植物激素(植物生长调节剂)

1.2.5培养条件

1.3花楸属树种繁殖研究进展

1.3.1花楸属树种种子繁殖及育苗研究进展

1.3.2花楸属树种扦插繁殖研究现状

1.3.3花楸属树种嫁接技术研究现状

1.3.4花楸属树种通过组织培养手段繁殖研究现状

1.4花楸概述

1.4.1地理分布

1.4.2生态学和生物学习性

1.4.3观赏价值

1.4.4经济价值

1.4.5目前栽植和市场现状

1.5课题的目的和意义

2试验材料和方法

2.1试验材料的采集、处理和消毒

2.1.1以幼胚为外植体

2.1.2以成熟胚为外植体

2.1.3以茎段和嫩叶为外植体

2.2仪器设备、试剂的准备

2.3培养基的制备

2.3.1培养基的制备程序

2.3.2实验中使用的培养基

2.4培养条件

2.5数据统计

2.6培养步骤

2.6.1增生途径

2.6.2根的诱导

2.6.3炼苗和移栽

3结果与分析

3.1以幼胚为外植体

3.1.1丛生芽的诱导

3.1.2丛生芽的继代、增殖

3.1.3以无菌茎丛带节茎段为外植体进行腋芽增殖

3.1.4茎丛生根

3.1.5生根幼植株的壮苗、移栽

3.2以成熟胚为外植体

3.2.1以成熟胚为外植体诱导愈伤组织

3.2.2以成熟胚为外植体诱导丛生芽

3.3以花楸幼嫩茎段为外植体

3.3.1花楸幼嫩茎段愈伤组织的诱导

3.3.2幼嫩茎段愈伤组织的增殖、分化

3.4以花楸嫩叶为外植体

3.4.1花楸嫩叶愈伤组织的诱导

3.4.2嫩叶愈伤组织的继代培养

3.5不同外植体脱分化比较

4结论与建议

4.1实验的结论

4.1.1以花楸幼胚为外植体通过不定芽途径建立了组培再生系统

4.1.2以无菌茎丛的带节茎段为外植体通过腋芽增殖途径建立组培再生系统

4.1.3以花楸成熟胚为外植体建立再生系统

4.1.4以花楸幼嫩茎段为外植体的愈伤组织诱导及增殖

4.1.5以花楸嫩叶为外植体的愈伤组织诱导及增殖

4.2实验存在的问题及建议

4.2.1愈伤组织的分化

4.2.2外植体消毒问题

4.2.3今后的任务

参考文献

附录

致谢