分子生物学技术在昆虫学研究中的应用——利用RAPD技术研究东北地区十八种小卷蛾的亲缘关系及落叶松毛虫卵寄生蜂的分子监测

摘要

该文是利用RAPD-PCR技术对东北地区黄卷蛾族的十八种小卷蛾的基因组进行随机扩增,以期能对其亲缘关系进行分析,从而能构建出系统发育树,了解这些物种进化方面的信息.从构建出的系统发育树与形态学描述比对后得到结论:利用RAPD技术所构建的系统树从分子水平部分反映了的物种进化的客观规律.从系统树可以看出花楸烟卷蛾同其余十七种是可区分的两个类群,在形态学上的体现则是花楸烟卷蛾雌性外生殖器无囊突,而其它种类具有,两者是一致的.忍冬双斜卷蛾和松褐卷蛾的相似系数达1.0301,说明两个种的亲缘关系很近,形态学的比较上也体现出在两个种的生殖器的形态结构上有较多的相似之处,比如雄性外生殖器的爪形突都宽,抱器瓣圆形;雌性外生殖器的囊突有锤状突起等.但是它们是属于两个不同的属,而同为一个属的忍冬双斜卷蛾和棉花双斜卷蛾的相似系数则为0.0505,亲缘关系相去甚远.两者的矛盾目前还没有令人信服的解释.这也反映出RAPD技术具有一定的局限性,要构建出物种真实的系统发育树必须综合各方面的资料进行分析.该论文的另一部分是关于落叶松毛虫卵寄生蜂分子检测的内容.通过该文中的实验证明ITS2序列用于落叶松毛虫卵寄生蜂的鉴定是可行的,经扩增后的落叶松毛虫卵寄生蜂和落叶松毛虫的ITS2电泳图谱显示出落叶松毛虫卵跳小蜂、落叶松毛虫黑卵蜂、松毛虫卵宽缘金小蜂和落叶松毛虫ITS序列的片段长度是完全不同的,并且干扰实验也表明各自的谱带是完全可以区分无干扰.但是在实际的应用上还存在一定的问题,因为所分析的寄生蜂属于三个科,没有近缘种或姐妹种的比较,因而不能否认有干扰的可能性.随后还需要大量的实验去验证和解决所出现的问题.

目录

文摘

英文文摘

前言

1研究综述

1.1十八种小卷蛾的形态特征及其生物学习性

1.1.1梨黄卷蛾Archips breviplicanus(Walsigham，1900)

1.1.2桦黄卷蛾Archips decretanus(Treitschke，1835)

1.1.3苹黄卷蛾Archips ingentanus(Christoph，1881)

1.1.4云杉黄卷蛾Archips oporanus(Linnaeus，1758)

1.1.5红黄卷蛾Archips subrufanus(Snellen，1883)

1.1.6九江卷蛾Argyrotaenia liratana(Christoph)

1.1.7西宁卷蛾Argyrotaenia pulchellana(Haworth，1811)

1.1.8花楸烟卷蛾Capua vulgana(FrOlich，1828)

1.1.9棕色卷蛾Choristoneura luticostana(Christoph，1888)

1.1.10棉花双斜卷蛾Clepsis pallidana(Fabricius，1776)

1.1.11忍冬双斜卷蛾Clepsis rurinana(Linnaeus，1758)

1.1.12松褐卷蛾Pandemis cinnamomeana(Treitschke，1830)

1.1.13桃褐卷蛾Pandemis dumetana(Treitschke，1825)

1.1.14苹褐卷蛾Pandemis heparana(Denis et Schiffermuller,1775)

1.1.15山褐卷蛾Pandemis monticolana(Yasuda,1975)

1.1.16樱桃铅卷蛾Ptycholoma imitartor(Walsingham，1900)

1.1.17落叶松卷蛾Ptycholoma aeriferanus(Herrich-Schaffer，1851)

1.1.18灰综卷蛾Syndemis musculana(Hubner，1796-1799)

1.2传统分类方法对十八种小卷蛾的亲缘关系的阐述

1.3RAPD技术

1.3.1PCR技术

1.3.2RAPD标记的原理和特点

1.3.3KAPD-PCR的影响因素及解决办法

1.3.4在昆虫学方面的应用

1.4落叶松毛虫卵寄生蜂

1.4.1种类

1.4.2形态特征描述及生物学习性

1.5核rDNA的ITS序列在昆虫学上的应用

1.5.1核rDNA的结构

1.5.2ITS序列特点

1.5.3在昆虫学研究上的应用

2东北地区十八种小卷蛾的RAPD实验

2.1材料和方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果与讨论

3落叶松毛虫卵寄生蜂的分子检测

3.1材料和方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2结果与讨论

参考文献

致谢