长春花中单吲哚生物碱-文多灵和长春质碱的分离纯化工艺

摘要

本文研究了从长春花中提取、分离纯化文多灵和长春质碱的制备工艺，主要研究内容及结果如下：
　　1.确定了长春花中文多灵和长春质碱的分析方法:
　　分析方法:色谱柱为Diamonsil C18 ODS(250 mm×4.6mm，5μm);流动相为乙腈:0.013mol/L碳酸氨水溶液(1∶1);流速为1.0mL/min;柱温为常温;检测波长为215nm。方法学考察结果表明该方法检测结果准确可靠。分析样品处理方法:微波辅助制备分析样品工艺流程:以固液比1∶10加入80％乙醇，静止浸泡1h后，用250W微波辐照2min，停止辐照，过滤，得提取液。提取3次。
　　2.文多灵和长春质碱的提取分离和纯化工艺:
　　长春花总碱提取工艺流程:固液比为1∶10，加入pH为1.5的硫酸水溶液，匀浆提取30min，滤出提取液。然后加入用硫酸调节pH为1.5的50％甲醇水溶液，进行负压空化混旋提取3次，每次25min。抽滤，合并酸甲醇水提取液，减压浓缩除去甲醇，将剩余水相部分与第一次的匀浆提取液合并，用浓氨水调pH＞10，再用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，减压浓缩至干，得长春花总生物碱浸膏。其中文多灵和长春质碱纯度分别为4.93％和2.83％，收率分别为92.41％和90.92％。
　　文多灵和长春质碱精制粗品工艺流程:将长春花总碱用二氯甲烷溶解，用量为二氯甲烷∶总碱(m∶m)=2∶1，用等体积浓度为1％的硫酸水溶液萃取，至二氯甲烷层中无文多灵、长春质碱和长春碱，得酸水液，将酸水层用浓氨水调节pH值到4.0，用等体积乙酸乙酯液液萃取3次。合并乙酸乙酯层，减压浓缩至干。得文多灵和长春质碱精制粗品.其纯度分别为18.12％和11.44％，收率分别为80.86％和88.91％。
　　文多灵和长春质碱纯化工艺流程:取200-300目含水量为1％的碱性氧化铝以二氯甲烷为分散剂，采用湿法填充，径高比为3∶7。取含文多灵和长春质碱的精制粗品少量二氯甲烷溶解以样品:碱性氧化铝(1∶33)的上样量上样。加入二氯甲烷为洗脱剂，分别收集文多灵和长春质碱部分，加压浓缩至干，得文多灵和长春质碱。其纯度分别为85.56％和76.73％，收率分别为85.23％和86.34％。将柱层析所分离文多灵部分用适量环己烷溶解，长春质碱部分用适量饱和的酒石酸乙醇溶液溶解，分别于4℃下静置隔夜，进行重结晶，得纯度大于95％的纯品文多灵和酒石酸长春质碱。文多灵和长春质碱的纯度分别为95.22％和98.46％，收率分别为92.15％和98.24％。
　　长春花中文多灵和长春质碱的分离纯化工艺的全过程中文多灵和长春质碱的纯度分别为95.22％和98.46％，收率分别为55.23％和61.86％。

目录

摘要

英文摘要

1 绪论

1．1 长春花资源概述

1．2 长春花的化学成分

1．3 长春花研究进展

1．4 文多灵和长春质碱在长春花中生物碱合成途径中的作用

1．5 文多灵和长春质碱偶合成长春碱类抗癌药物的化学合成途径

1．5．1 以文多灵和长春质碱为原料合成脱水长春碱

1．5．2 以文多灵和长春质碱为原料合成长春碱

1．5．3 以文多灵和长春质碱为原料合成长春新碱

1．5．4 以文多灵和长春质碱为原料合成长春瑞宾

1．6 文多灵和长春质碱的提取、纯化方法的研究进展

1．7 本项研究的立题依据及目的意义

2 长春花文多灵和长春质碱HPLC分析方法的确立

2．1 仪器

2．2 试剂及材料

2．3 HPLC分析条件的确定

2．3．1 标准样品的制备

2．3．2 样品的制备

2．3．3 检测波长的确定

2．3．4 HPLC流动相组成和比例的确定

2．3．5 标准曲线的绘制

2．3．6 精密度的考察

2．3．7 稳定性的考察

2．3．8 重现性试验

2．3．9 加样回收率的考察

2．4 分析样品的制备和测定

2．4．1 仪器

2．4．2 试剂及材料

2．4．3 微波辅助制备样品

2．5 小结

3 长春花中文多灵和长春质碱的提取工艺

3．1 仪器

3．2 试剂及材料

3．3 长春花总碱的提取工艺参数的优化

3．3．1 提取溶剂的选择

3．3．2 提取溶剂pH值的选择

3．3．3 提取溶剂中酸性调节物的选择

3．3．4 提取时间的选择

3．3．5 固液比对提取效果的影响

3．3．6 提取次数的选择

3．4 溶剂萃取长春花中总生物碱工艺参数的优化

3．4．1 萃取溶剂的选择

3．4．2 萃取次数的确定

3．5 中试放大试验

3．6 本章小结

4 长春花中文多灵和长春质碱纯化工艺

4．1 仪器

4．2 试剂及材料

4．3 pH梯度萃取分离文多灵和长春质碱工艺参数的优化

4．3．1 萃取pH值的确定

4．3．2 萃取次数的确定

4．4 文多灵和长春质碱柱层析纯化工艺参数的优化

4．4．1 碱性氧化铝粒径对文多灵和长春质碱分离效果的影响

4．4．2 碱性氧化铝含水率对文多灵和长春质碱分离效果的影响

4．4．3 碱性氧化铝柱径高比对文多灵和长春质碱分离效果的影响

4．4．4 上样量对文多灵和长春质碱分离效果的影响

4．4．5 洗脱剂流速对文多灵和长春质碱分离效果的影响

4．4．6 中试水平文多灵和长春质碱分离效果的考察

4．5 重结晶

4．6 本章小结

结论

参考文献

附录

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

声明