红光弱光下长春花中生物碱累积及对几种关键酶基因表达影响

摘要

本文以长春花组培苗为实验材料，采用人工遮蔽的方法制造出红光弱光环境，同时设立非遮蔽自然光的对照组，同期取样，以探讨光质光强同时改变下，长春花叶绿素的变化、长春花MIA合成途径中生物碱积累的变化和关键酶表达的变化规律。研究结果如下：
　　1、红光弱光条件下，叶绿素含量降低，叶绿素a/b值减小，说明长春花植株光合能力下降。处理后光能不足，类胡萝卜素含量降低;但叶绿素类胡萝卜素之比（Car/Chl）没有显著差异，因此推测处理后光保护能力没有下降。
　　2、利用HPLC技术检测了样品中文多灵、长春质碱和长春碱的含量，分析了3种生物碱处理后的变化规律。结果表明，前30天文多灵和长春质碱的的含量减少，长春碱的含量增加，3种生物碱的总积累量降低，仅在45天点文多灵和长春质碱含量突然剧增，长春碱含量反而降低，3种碱总含量虽然增高，但此处理环境仍不适合长春花的培育。
　　3、利用RT-PCR，检测MIA合成途径中编码关键酶的基因表达情况。结果显示，MEP途径中的DXS和DXR基因的表达量仅在处理初期略微降低，之后表达量很快恢复正常;对照组G10H随苗龄表达量上调，处理前期G10H整体微弱上调，后期表达量略低于对照组;TDC表达变化没有明显规律;对照组STR的表达随苗龄上调，总体来看处理后STR表达有些受抑制;文多灵合成途径中的D4H对照组表达无规律，处理后反而有较稳定的表达;DAT处理后短期内有稳定的表达，并高于对照组，大体上与文多灵的含量成正向关系。只有STR、D4H和DAT能看出与生物碱有正向关系或反向调节作用。

目录

摘要

1 绪论

1．1 长春花简介

1．2 光对植物生长关系影响的研究

1．2．1 光强对植物生长的影响

1．2．2 光质对植物生长的影响

1．3 长春花MIA生物合成途径研究

1．3．1 长春花MIA合成的组织培养技术研究

1．3．2 长春花MIA生物合成途径中生物碱的研究

1．3．3 长春花MIA生物合成途径关键酶的研究

1．3．4 环境因子对长春花MIA积累的影响

1．4 本研究的目的和意义

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 长春花组培苗的栽培

2．1．2 长春花的光处理

2．1．3 光处理的测定

2．1．4 实验材料的取样

2．2 实验方法

2．2．1 叶绿素含量的测定

2．2．2 长春花中三种生物碱的HPLC测定

2．2．3 长春花MIA生物合成中关键酶基因表达的检测

3 结果与讨论

3．1 红光弱光处理下长春花中叶绿素的含量变化

3．2 红光弱光处理下长春花中3种生物碱的含量变化

3．3 红光弱光处理下长春花生物碱代谢途径中关键基因的表达

3．3．1 RNA的质量检测

3．3．2 RNA的电泳检测

3．3．3 RT-PCR检测基因表达的结果及分析

3．4 几种关键酶基因表达水平与叶绿素和生物碱的关系

结论

参考文献

附录

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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