新疆紫草中紫草素及其衍生物的分离纯化研究

摘要

本论文以我国新疆紫草为原料,采用一系列的技术工艺对紫草素进行了提取、制备,并将紫草素衍生物进行分离。本文对新疆紫草中紫草素及其衍生物的高效提取分离、制备的工艺进行了系统地研究,其主要内容如下:
　　 建立了高效液相色谱(HPLC)方法检测紫草素的方法,其色谱条件为:流动相:甲醇:水:乙酸(82:17.5:0.5),色谱柱:Kromasil C18(5μm,4.6mm×250 mm),流速:1.0ml/min,柱温:室温(25℃),检测波长:516nm,进样量:10μL。
　　 确定适合以新疆紫草为原料提取紫草素化合物的方法,并对其提取方法工艺条件进行了优化。考察了匀浆提取时间、乙醇体积分数、液料比和提取次数等因素对提取工艺的影响,并在单因素试验基础上,根据中心组合试验设计原理采用三因素三水平的响应面分析法进行工艺优化,得到提取过程优化的工艺条件:提取时间为3.96 min,液料比10.19:1,乙醇体积分数82.44％,提取次数为2次,紫草素的实际得率可达0.093‰,纯度为0.326％。匀浆提取比其他常规提取方法操作简单,省去了对物料进行烘干、粉碎的步骤,并使物料破碎和有效成分的提取同步进行,是一种对植物有效成分提取速度快、强度高的方法。采用匀浆法从新疆紫草中提取紫草素类化合物,有效地避免了紫草素损失,并具有提取速度快,温度低,能耗低的特点,适合紫草素萘醌类化合物的大规模生产。
　　 进行了离子交换树脂对新疆紫草提液中紫草素催化制备工艺参数的研究。通过对D261、D290、D296、D301-R、D301-G、201*7(717)、和D280等7种阴离子离子交换树脂对新疆紫草提取液中紫草素酯类衍生物催化水解性能指标的考察,筛选出用树脂D290制备紫草素。D290树脂水解制备紫草素的最佳工艺条件为,水解吸附条件:温度为20℃,水解时间为30min,树脂用量为2.5 g(按绝干计),提取液紫草素浓度为0.006049 mg/ml,洗脱剂为4％HCl-80％乙醇溶液,洗脱时间为30min。在优选的水解吸附与解吸附工艺条件下,紫草素浓度又原来的0.006049 mg/ml增加至0.0531 mg/ml,含量为0.0106％,增加率为777.83％。
　　 采用硅胶柱层析法进一步分离紫草素衍生物,其具体工艺参数为:柱层析填料为300～400目硅胶,层析柱径高比4cm×27cm,洗脱溶剂为不同体积比的石油醚与乙酸乙酯溶液,洗脱流速为3.255mL/min。高效液相色谱法检测确定已分离出紫草素及其5种衍生物,经过进一步的液相-质谱分析,确定其中4种化合物。