hTERT及c-myc基因反义寡核苷酸对HL-60细胞的抑制作用

摘要

本文通过动物实验，对hTERT及c-myc基因反义寡核苷酸对HL-60细胞的抑制作用进行了研究。文章采用脂质体包裹技术将硫代修饰的hTERT及c-myc基因ASODN分别及联合转染HL-60细胞，封闭hTERT及c-myc基因的表达，观察其对白血病细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响。从不同作用途径阻断白血病相关基因的表达，探讨了不同白血病基因ASODN的相互作用及机制具有重要意义。研究表明，hTERT及c-mycASODN对HL-60细胞的增殖及其mRNA表达有明显的抑制作用，其抑制作用具有序列特异性及浓度、时间依赖性；证实了hTERT及c-mycASODN具有抑制端粒酶活性的作用，hTERTASODN的抑制作用强于c-mycASODN；证实了hTERT及c-mycASODN均具有诱导HL-60细胞凋亡的作用；hTERT及c-mycASODN联合作用组与单用组比较对HL-60细胞的抑制效应无显著性差异；移植瘤细胞经传代接种后致瘤性明显增强，hTERTASODN注射至裸鼠移植瘤局部能抑制肿瘤生长并促进肿瘤细胞的凋亡；hTERT及c-mycASODN分别与CDDP联合应用能够增强CDDP对HL-60细胞增殖的抑制作用及诱导HL-60细胞凋亡作用。

目录

文摘

英文文摘

郑重声明

前言

第一部分hTERT及c-myc反义寡核苷酸对HL-60细胞增殖、端粒酶活性、凋亡及其mRNA表达的影响

第一章hTERT及c-myc基因反义寡核苷酸对HL-60细胞增殖及其mRNA表达的影响

材料与方法

结果

结果1.HL-60细胞的生长曲线和倍增时间

结果2.转染后细胞的形态学改变

结果3.反义寡核苷酸对HL-60细胞增殖、代谢的抑制作用

结果4.逆转录PCR

第二章hTERT及c-myc基因反义寡核苷酸对HL-60细胞端粒酶活性的影响及诱导凋亡作用

材料与方法

结果

结果1.反义寡核苷酸对HL-60细胞端料酶活性的抑制作用

结果2.ASODN诱导细胞凋亡的作用

讨论

小结

第二部分hTERT反义寡核苷酸转染前后的HL-60细胞对裸鼠致瘤性及肿瘤生长和细胞凋亡的影响

第一章hTERT反义寡核苷酸转染前后的HL-60细胞对裸鼠致瘤性的影响

材料与方法

结果

第二章hTERT基因反义寡核苷酸在裸鼠移植瘤模型体内抗白血病作用的研究

材料与方法

结果

讨论

小结

第三部分hTERT及c-myc基因反义寡核苷酸对化疗药物诱导HL-60细胞凋亡的影响

材料与方法

结果

讨论

小结

结论

参考文献

综述:反义技术与白血病相关基因的研究现状

一、反义技术的基本原理有研究进展

二、的义技术与白血病相关基因的研究

三、反义技术存在问题及应用前景

四、反义技术与RNA干扰技术

五、结语

参考文献

英文缩略词

攻读学位期间发表文章及成果

致谢