慢性乙肝患者血清TIMP-1、HA、PⅢP水平与肝纤维化关系的研究

摘要

肝纤维化是肝细胞受损后的一种异常修复过程，其实质是肝细胞外基质(Extracellularmatrix,ECM)合成与降解失衡，ECM在肝内过度沉积。基质金属蛋白酶(MatrixMet．alloproteinases,MMPs)是降解ECM最主要的酶类，而基质金属蛋白酶抑制因子(TissueInhibitorsofMetalloproteinases,TIMPs)为MMPs特异性抑制剂。TIMP．1是TIMPs家族中分布最广泛的成员，不但能抑制MMPs酶原及活性MMPs，阻止迅速集聚的ECM降解，且能抑制产胶原的肝星状细胞(Hepaticstellatecells,HgCs)凋亡，从而在肝纤维化进展中发挥重要作用。肝纤维化时TIMP．1合成增多，血清TIMP．1有望成为评价肝纤维化程度的有效指标。血清透明质酸(hyaluronicacid，HA)、III型前胶原氨基端肽(amino-terminalpeptideoftypeIIIprocollagen，PIIIP)、Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen，CⅣ)、层粘连蛋白(1aminin，LN)是临床研究较多的肝纤维化标志物，联合检测多项血清学指标可望为肝纤维化的诊断提供相对准确的实验依据。 目的：通过检测慢性乙肝患者血清肝纤维化指标TIMP．1、HA、PIIIP、CB／、LN及肝功能检查项目：丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase，ALT)、天门冬酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase，AST)、白蛋白(albumin,ALB)、总胆红素(totalbilimbin，TBIL)水平，分析各指标与肝纤维化分期(S)和炎症分级(G)的关系，探讨血清TIMP．1、HA、PIIIP诊断肝纤维化和早期肝硬化的灵敏度和特异度，寻找肝纤维化非创伤性诊断的优化组合。 方法：L40例慢性乙型肝炎患者入院后在B超引导下行肝脏穿刺活检术，常规甲醛固定，石蜡包埋，连续切片做苏木素．伊红和Masson三重染色，行肝脏纤维化分期(S04)和炎症活动度分级(G0-4)。2．患者于肝穿次日清晨空腹抽取静脉血5mi，离心后置-20~C冰箱保存备用，统一行双盲检测。用酶联免疫吸附法(Enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)检测患者和12名健康体检者(对照组)血清TIMP．1浓度，放射免疫法(radioimmunoassay，RIA)检测血清HA、PIIIP、CIV、LN水平，常规检测肝功能及肝炎病毒标志物。3．利用SPSSl0．0软件对数据进行统计学处理：以病理诊断为金标准，将血清学指标及肝功能项目与肝纤维化分期及炎症分级进行相关性分析；利用BinaryLogistic回归分析筛选诊断肝纤维化的优化指标，采用ROC曲线评价各指标诊断肝纤维化的灵敏度和特异度，评定血清TIMP．1、HA、PIIIP诊断肝纤维化及早期肝硬化的截断值。 结果：1. 40例慢性乙肝患者肝穿病理组织学检查结果：s0期4例，Sl期7例，S2期11例，S3期12例，S4期6例。G0期0例，GI期7例，G2期15例，G3期9例，G4期9例。 2．血清TIMP．1在肝纤维化早期(Sl期)即升高(214．6~49．2)，明显高于对照组(132．0±19．8)(P<0．01)；随纤维化程度加重其水平上升，且在纤维化各分期间差异有统计学意义(P<0．01或P<0．05)；血清TIMP．1与S、G呈正相关，相关系数(rs)分别为0．878、0．616；以258．28μg/L为截断值，血清TIMP．1诊断肝纤维化(S52)的灵敏度为0．916，特异度为0．909；以389．30μg/L为截断值，诊断早期肝硬化(s=4)的灵敏度为0．833，特异度为0．882；此指标诊断肝纤维化及早期肝硬化的ROC曲线下面积(AUC)分别为0．912和0．911。 3．血清HA、PIIIP随纤维化程度加重水平上升，各分期间差异不及TIMP．1显著；HA、PIIIP与S的rs分别为0．828、0．774；HA诊断早期肝硬化、PIIIP诊断肝纤维化的AUC分别为0．901、0．906。 4．血清C1V、LN随纤维化程度加重而升高，但各分期间差异不显著，与S无明显相关性。 5．随肝脏炎症程度加重，血清ALT、AST水平显著升高，与G的rs分别为0．847、0．761，但与纤维化分期无明显相关性；ALB与肝纤维化程度及TIMP．1呈负相关。 结论：1. 血清TIMP．1水平随肝纤维化程度加重明显升高，对判断不同时期肝纤维化有重要价值；该指标诊断肝纤维化、早期肝硬化具有较高灵敏度和特异度，不仅有助于活动性肝纤维化的动态观察，对早期肝硬化的早诊早治也有一定指导意义。 2．血清HA、PIIIP与肝纤维化的相关性低于TIMP．1；血清PIIIP对肝纤维、HA对早期肝硬化的诊断有一定价值。 3．血清CIV、LN及肝功能项目与纤维化分期无明显相关性，对诊断肝纤维化价值不大。 4．血清ALT、AST与肝脏炎症分级显著正相关，可反映肝细胞炎症活动度。 5．血清TIMP．1、HA、PIIIP可作为肝纤维化非创伤性诊断的优化组合，联合检测能够对肝纤维化程度作出比较明确的诊断，为临床治疗提供有效的实验依据。

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小结

附图

参考文献

综述基质金属蛋白酶抑制因子与肝纤维化

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