兔眼自体脉络膜视网膜色素上皮移植的初步实验研究

摘要

背景和目的 以年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration，ARMD)为代表的黄斑部病变是一类严重影响中心视力的疾病，目前尚无有效的治疗方法，人们在积极探讨其发病机制的同时，试图通过药物、激光、手术等方法进行治疗，而视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)细胞移植就是手术中的一种。 1983年Gouras等首次报道了RPE细胞的移植，之后又有不少相关的报道，并取得了一些可喜的成就。然而，也提出了不少的问题，象如何在移植过程中保持RPE细胞的极性，RPE单层细胞培养和载体选择，和如何避免移植过程中的免疫排斥。本实验用兔作为实验对象，探讨自体RPE细胞-Brtlch膜-脉络膜移植的可行性，为进一步的免疫、病理及相关研究提供参考，为临床提供理论依据。 材料和方法 选取健康青紫兰兔20只，体重1.5-2.0 kg，3月龄，雌雄不限。检查证实无眼部疾患，选取右眼为受体眼，左眼为供体眼。做好术前准备后，左眼行眼球摘出备用，右眼行晶状体玻璃体联合切除术，保留晶状体前囊，待右眼手术完成后开始制备兔左眼RPE细胞-Bruch膜-脉络膜移植片，沿角膜缘360度剪开，用棉签轻轻擦去其内的玻璃体，在显微镜下于兔眼的赤道部剪除大小约为2.0mm×2．0mm的区域，用棉签轻轻擦去其上的视网膜神经上皮，用视网膜镊从巩膜上分离RPE细胞-Bruch膜-脉络膜复合体，待用。用1ml注射器抽取少量灌注液通过玻切通道进入受体眼即右眼的玻璃体内，在鼻下象限距离视盘约2-3PD处刺穿视网膜神经上皮，将灌注液注入神经上皮下，制造一个局限性的视网膜脱离，然后切开神经上皮将准备好的RPE细胞-Bruch膜-脉络膜复合移植体植入脱离的视网膜神经上皮下，将视网膜神经上皮复位，气液交换，硅油填充至指测眼压正常，缝合三切口及结膜。结膜下注射庆大霉素2万单位，地塞米松2.5mg，红霉素及阿托品眼膏涂眼。术后一周内典必殊滴眼液点眼，每天4次。术后2周内每2-3天用裂隙灯及检眼镜检查眼部情况，观察眼前节及眼底，移植物情况，后每周观察一次。 术后2月和3月分别对手术成功兔眼进行眼底彩色照片采集；术后3月对手术成功兔眼进行荧光素和吲哚氰绿联合眼底视网膜和脉络膜双重造影。 结果 20只兔中，视网膜脱离2只，玻璃体积血增生性视网膜病变5只，移植物卷曲、重叠、或移位的4只，感染性眼内炎1只，以上结果多发生在手术初期，与手术操作不熟练有关；屈光间质透明、视网膜平复、移植体平整、边界清晰的受体眼共8只。术后2月眼底彩照可见视网膜平复，移植的RPE细胞-Bruch膜-脉络膜复合移植体清晰可见，边界清晰；术后3月眼底彩照同2月前。荧光素及吲哚氰绿联合造影结果显示：可见视盘，视网膜大血管，视盘下方术后瘢痕区，及较大的瘢痕区下方的RPE细胞-Bruch膜-脉络膜复合移植体，移植体的边界清晰，与手术移植位置相符，移植体有脉络膜荧光显示，与受体眼周围脉络膜荧光无明显差别。 结论 1．兔眼自体RPE细胞-Bruch膜-脉络膜移植可以建立动物模型2．眼底照相和眼底血管造影检查显示移植体成活并具有正常的外观和脉络膜荧光

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文摘

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材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 染色剂在玻璃体切除术中的应用——染色玻璃体切除术

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