乙酰肝素酶、MMP2和TIMP2蛋白在恶性黑素瘤中的表达及意义

摘要

恶性黑素瘤(malignant melanoma,MM)简称恶黑,是一种高度恶性的肿瘤,常原发于皮肤及粘膜组织,可广泛浸润皮肤表皮至皮下组织或粘膜及粘膜深层组织,甚至相邻器官(或组织),并可通过淋巴结、血行远处转移,或广泛播散,发病率占皮肤恶性肿瘤的第三位(3﹪～5﹪),死亡率极高,其浸润、转移又是引起恶性黑素瘤患者死亡的主要原因,因此,对恶性黑素瘤浸润、转移机制的探讨已成为研究热点之一. 癌细胞一个最基本的特点-浸润转移,而在此过程中必需突破由细胞外基质(extracdlular matrix,ECM)和基底膜(basement membrane,BM)组成的屏障.该屏障主要由2种成分构成:(1)结构蛋白:包括胶原、层联蛋白、纤维结合蛋白和玻璃体结合素等;(2)糖氨聚糖:其主要成分是硫酸乙酰肝素蛋白多糖(hcparin sulfateproteoglycans,HSPGs).在过去的10多年中认为,结构蛋白的破坏是癌细胞侵袭、转移的关键步骤,研究大多集中在底物为结构蛋白的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)、丝氨酸蛋白酶以及半胱氨酸蛋白酶上.现在认为,糖氨聚糖作为细胞外基质和基底膜的另一主要成分也可以封闭、阻滞癌细胞的移动,其降解也是细胞侵袭前所必须的.乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)是新近克隆成功的酶,裂解连接于 HSPGs核心分子上硫酸肝素的一类内切糖苷酶,是抗肿瘤的理想靶点<,[1]>.目前Hpa、MMP2(matrix metalloproteinase.2)和TIMP2(tissueinhibitor of matrix metalloproteinase-2)单独或联合其他指标在皮肤恶性黑素瘤(cutaneous malignant melanoma,CMM)中的研究已有报道,但三者联合在CMM中表达的研究尚未见报道,MMP2和TIMP2在乙酰肝素酶反义寡核苷酸(heparanase antiscnso oligodeoxynucleotide,Hpa-ASODN)转染的裸鼠恶性黑素瘤移植瘤组织中表达的研究未见报道.为进一步探讨Hpa、MMP2和TIMP2蛋白的表达与恶性黑素瘤浸润、转移的关系;寻求早期检测恶性黑素瘤浸润、转移的指标及寻找抑制恶性黑素瘤浸润、转移的有效方法,本文采用免疫组织化学SP技术检测了30例CMM、30例黑素细胞痣及15例正常皮肤组织中Hpa、MMP2和TIMP2蛋白的表达情况;用Hpa-ASODN分组转染培养的A375细胞,分组注入裸鼠皮下,在裸鼠体内构建恶性黑素瘤移植瘤动物模型,采用免疫组织化学SP技术检测裸鼠恶性黑素瘤移植瘤组织中与Hpa作用相关的MMP2和TIMP2蛋白的表达情况.通过以上实验,试图阐明Hpa、MMP2和TIMP2蛋白的表达在恶性黑素瘤浸润、转移中的意义;Hpa-ASODN对MMP2和TIMP2的抑制作用.为进一步探讨恶性黑素瘤浸润、转移机制及其阻断治疗提供理论依据.

目录

文摘

英文文摘

前言

第一部分乙酰肝素酶、MMP2和TIMP2蛋白在皮肤恶性黑素瘤、黑素细胞痣和正常皮肤组织中的表达及意义

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

照片

参考文献

第二部分MMP2和TIMP2蛋白在乙酰肝素酶反义寡核苷酸转染的裸鼠恶性黑素瘤移植瘤中表达的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

照片

参考文献

结论

综述 乙酰肝素酶、MMP和TIMP与肿瘤浸润、转移的关系

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