硫酸软骨-素酶ABC(chABC)对大鼠坐骨神经损伤的实验研究

摘要

目的:周围神经(PNS)损伤后神经的功能恢复通常是不完全的。再生神经的出芽生长过程中会有生长促进因子,也有生长抑制因子,一个重要的抑制因子是硫酸软骨素糖蛋白聚糖(CSPGs)和其上的糖胺多糖侧链(GAG)。而这种抑制作用可以通过硫酸软骨素酶ABC(chABC)分解GAG侧链并清除CSPGs的抑制作用。本实验研究目的在于验证chABC对注射在神经缺损部位后是否有促进坐骨神经再生的功能。
　　 方法:将72只SD大白鼠双侧坐骨神经切断。造成10m神经缺损模型,用甲壳素导管桥接神经缺损后随机分为A、B、C,3组,每组24只。A组实验组:甲壳素神经导管内注入等量聚乳酸-聚乙醇酸-chABC缓释微球(chABC-PLGA)20μl,B组赋形剂组:甲壳素神经导管内注入等量聚乳酸-聚乙醇酸微球20μl,C组空白对照组:甲壳素神经导管内注入等量的等渗盐水20μl。术后4周、8周再次暴露再生坐骨神经引在体神经电生理检查,监测再生神经动作电位传导速度,Loyez氏化学染色及S-100免疫组织化学染色对标本分析,以评估再生神经。采用Image-Pro Flus6.0图像分析系统作图像分析。
　　 结果:
　　 1、术后4周、8周组织学观察见有再生神经通过再生室,其间有新生血管。
　　 2、运动神经电生理(NCV)检查:术后4周、8周均可检测到动作电位,神经电生理检查A、B、C三组比较有差别。两两比较A组再生神经传导速度优于B、C组,差异有统计学意义,B、C组再生神经传导速度差别无统计学意义。
　　 3、S-100免疫组织化学染色:各组大鼠再生神经均见S-100阳性染色细胞,分布较为均匀。A、B、C三组比较有差别。两两比较A组再生神经传导速度优于B、C组,差异有统计学意义,B、C组再生神经传导速度差别无统计学意义。
　　 4、Loyez氏神经染色:A组神经纤维数多于B、C组,差异有统计学意义,B、C组再生神经纤维数差别无统计学意义,组间比较。
　　 结论：
　　 1、甲壳索神经再生导管内填充硫酸软骨素酶ABC可提高神经再生的效果。
　　 2、硫酸软骨素酶ABC没有影响坐骨神经损伤后的施万细胞的增殖。
　　 3、硫酸软骨素酶ABC能促进坐骨神经损伤后的神经传导,轴突再生和功能的恢复。