TGF-β1、MMP1、TIMP1在绝经后盆腔器官脱垂患者阴道壁组织中表达的研究

摘要

研究背景与目的：
　　 盆腔器官脱垂指因各种原因引起盆底肌肉、筋膜及子宫韧带支持功能薄弱，导致盆底器官(子宫、阴道、膀胱、尿道、直肠和小肠)脱离其正常解剖结构，是中老年妇女的常见疾病，常与压力性尿失禁(stress urinary incontinence，SUI)合并存在，统称盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction，PFD)。目前有关POP发生、发展的具体机制仍不十分清楚，所以研究其机制对于POP的诊断，治疗及预后判断十分重要。
　　 近年大量研究表明，盆底支持组织胶原的改变导致盆底支持结构松弛，是POP发生的主要原因。盆底的结缔组织主要由Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原组成，基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)是一组锌离子依赖性内肽酶，现已发现28种，是降解细胞外基质(extra ccllularmatrix，ECM)的蛋白酶，其中MMP1主要降解Ⅰ-Ⅲ型胶原。基质金属蛋白酶组织抑制物(tissue inhibitors ofmetalloproteinases，TIMPs)是MMPs的生理性抑制物，其中TIMP-1主要与MMP1和MMP8结合，抑制其对Ⅰ型、Ⅲ型胶原的降解。转化生长因子-β1(transforminggrowth factor-β1，TGF-β1)可以调节胶原的合成和降解，这一生物学作用部分地通过调节MMP1/TIMP1的表达而实现，而目前对此三者在POP发病机制中
　　 相互作用的研究报道很少。
　　 本实验采用免疫组化染色，研究绝经后正常阴道壁组织中、POP患者阴道壁组织中TGF-β1、MMP1及其抑制物TIMP1的表达及其相关性，探讨其在POP发生、发展中的意义，为POP的诊断和治疗提供理论依据。材料与方法：
　　 1研究对象：选取2008年7月至2009年5月河南省人民医院妇产科收治的绝经后POP患者30例，因妇科良性肿瘤行全子宫切除的绝经后无POP患者20例作为对照组，所选实验组POP患者均自诉无尿失禁症状。取患者阴道壁组织术前均签署知情同意书。所有入选者近3个月均未服用雌激素类药物和患功能性卵巢肿瘤，术后病理结果证实无与雌激素相关疾病，且以前无因压力性尿失禁和POP进行手术史。
　　 对照组和POP组均采用阴式子宫切除术或开腹子宫切除术，术中取患者阴道前壁中上段12点处组织约1.0cm×0.5cm×0.2cm，取下的标本立即用加有中性缓冲液的10％甲醛溶液浸泡，固定24h，之后标本用石蜡包埋，切片厚度约为2μm。部分切片进行HE染色，以从组织学上明确其结构。
　　 2实验方法：采用免疫组织化学方法(S-P)检测TGF-β1、TIMP1、MMP1在对照组及POP组阴道壁组织中的表达情况。两组患者阴道壁组织中TGF-β1、TIMP1和MMP1含量的表达以阳性区平均积分光密度为标准。
　　 3统计学分析：应用SPSS13.0统计软件进行分析，两组间数据比较采用t检验，运用Pearson相关系数来判断TGF-β1、TIMP1、MMP1蛋白表达的相互关系，检验水准均为a=0.05。结果：
　　 1镜下可见绝经后妇女阴道壁组织中均有TGF-β1阳性表达，阳性表达产物呈棕黄色，主要定位于细胞浆，POP组阳性区平均积分光密度为93.09，对照组为123.94，对照组表达强于绝经后POP组(P＜0.05)。MMP1亦在所有切片的细胞浆中显示阳性表达，POP组阳性区平均积分光密度为136.03，对照组为90.83，绝经后POP组的表达强于对照组(P＜0.05)。TIMP1在绝经后妇女阴道壁组织中均有阳性表达，阳性表达产物呈棕黄色，主要定位于细胞浆，POP组阳性区平均积分光密度为88.45，对照组为139.21，对照组表达强于绝经后POP组(P＜0.05)。
　　 2采用Pearson线性相关分析发现TGF-β1与TIMP1在阴道壁组织中的表达呈正相关，积差相关系数r=0.675(P＜0.05)。TIMP1与MMP1在阴道壁组织中的表达呈负相关，积差相关系数产-0.779(P＜0.05)。
　　 结论：
　　 1绝经后POP患者的阴道壁组织中的TGF-β1、TIMP1含量减少，MMP1含量增多，绝经后妇女POP的发生可能与此有关。
　　 2绝经后POP患者的阴道壁组织中TIMP1与MMP1的表达呈负相关，TGFβ1与TIMP1的表达呈正相关，TGF-β1本身即是影响胶原蛋白合成过程的重要因子，又能影响TIMP1与MMP1的表达，它们在绝经后妇女POP的发生中起重要作用，设想临床上可以通过调节TGF-β1、MMP1、TIMP1的含量改变盆底组织支持力，为绝经后POP患者的治疗提供新思路。

目录

文摘

英文文摘

英文缩略词表

TGF-B1、MMP1、TIMP1在绝经后盆腔器官脱垂患者阴道壁组织中表达的研究

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

3 统计学处理

结果

1 POP发病的主要影响因素

2 TGF-β1在POP患者阴道壁组织的表达

3 MMP1在POP患者阴道壁组织的表达

4 TIMP1的表达

5 TGF-β1与TIMP1的相关分析

6 TIMP1与MMP1的相关分析

7 TGF-β1与MMP1的相关分析

讨论

1 TGF-β1与POP的关系

2 MMP1、TIMP1与POP的关系

3 TGF-β1与TIMP1及MMP1的关系

结论

参考文献

附图

综述 TGF-B、MMPS、TIMPS与盆底功能障碍性疾病的关系

1 TGF-β

2 MMP 家族

3 MMPs抑制剂

4 TGF-β对MMPs和TIMPs表达的影响

5 胶原与PFD

6 TGF-β、MMPS、TIMPS与PFD

参考文献

个人简历

在学期间发表的学术论文

致谢