辣根过氧化物酶/吲哚三醋酸作用于人舌鳞癌细胞Tca8113的实验动物研究

摘要

目的:口腔颌面部恶性肿瘤约占全身恶性肿瘤的3％,而在口腔颌面部肿瘤、囊肿及瘤样病变中约占32.08％,虽然所占比例不高,但因其解剖部位特殊,涉及美观和重要的生理功能,因此对患者机体和心理的影响不容忽视。无序和无休止性生长、浸润和转移是恶性肿瘤的3个主要生物学特性。局部侵袭性是癌与非癌的基本区别。针对这些特性,目前的主要治疗方法包括手术治疗、化学药物治疗和放射治疗,以及新兴的生物治疗和康复治疗等。化学药物治疗作为临床治疗肿瘤的一种重要手段,已得到基础研究者和临床医生的认可,但是其毒副作用却不容忽视的,常见的毒副作用有骨髓抑制和胃肠道反应等,使患者的身心承受莫大的痛苦。因此,寻找新的低毒高效的抗肿瘤药物,在肿瘤的治疗中显得尤为重要。
　　 随着遗传学、免疫学和分子生物学的发展,针对肿瘤药物的研究已逐渐由细胞毒性药物向新型抗肿瘤药物发展,如生长因子抑制剂、肿瘤血管生成抑制剂、生物反应调节剂、肿瘤耐药逆转剂、基因工程药物前体药物等的研究。吲哚乙酸(IAA)作为一种植物生长激素,在植物细胞分裂、生长、分化过程中起关键作用。辣根过氧化物酶(HRP)是一种含有激素的植物过氧化物酶,可以氧化包括吲哚乙酸在内的一系列底物。HRP曾被用来转变吲哚前药IAA等类似物为有毒性的药物,用来杀灭活体内的细胞。IAA在人体内有很高的耐受性,不会被哺乳动物体内的过氧化物酶所氧化,只有在HRP存在时才会被氧化并转化为有毒性的物质,从而对周围组织细胞产生毒性作用。
　　 口腔颌面部鳞状细胞癌系口腔颌面部上皮源性恶性肿瘤,占口腔颌面部恶性肿瘤90％以上,是发病率和病死率较高的恶性肿瘤之一。Tca8113舌鳞癌细胞株培养己较为成熟,本实验借此细胞株研究HRP／IAA的抗肿瘤治疗效果,并希望能探讨出其治疗机理,为临床应用提供实验依据。
　　 方法:建立人舌鳞癌Fca-8113荷瘤裸鼠模型,将荷瘤裸鼠随机分为3组,每组8只:空白对照组(瘤内注射无菌生理盐水,2次／周)；阳性对照组(经腹腔注射氟尿嘧啶,40mg／g,2次／周)；实验组(HRP:24mg／L,IAA:2mM,各0.1ml瘤内注射,2次／周)。实验时间共21天,从药物干涉第3天起观察各组裸鼠的肿瘤体积变化、体重变化及生命体征。第23天处死裸鼠后,取出瘤体称重,计算抑瘤率,并进行组织蜡块病理切片,用免疫组织化学法检测各组肿瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)和B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)的表达情况；解剖裸鼠内脏取出心脏、肝脏、肺、脾脏、肾脏、睾丸等器官,采用HE染色,观察脏器细胞形态,了解药物对脏器的毒性。
　　 结果:阳性对照组和实验组的抑瘤率分别为56.02％、49.21％,与空白组对照比较有统计学意义；实验组裸鼠体重未见明显下降,与对照组比较无明显差异。HE病理形态学染色观察显示,实验组对裸鼠各脏器未发现明显毒副作用；阳性对照组和实验组裸鼠肿瘤组织中的PCNA、Bcl-2的表达均低于对照组,与之比较有显著性差异；阳性对照组和实验组间无明显差异。
　　 结论:
　　 1.HRP／IAA抗肿瘤机制可能是促进肿瘤细胞发生凋亡(对PCNA、Bcl-2表达的抑制),从而达到抗癌的作用,抑制肿瘤的生长；
　　 2.HRP／IAA对Tca-8113荷瘤裸鼠有抑瘤作用,能够抑制肿瘤生长；
　　 3.HRP／IAA短期内对Tca-8113荷瘤裸鼠的体重及内脏无明显影响；