水液缺乏性干眼患者的球结膜共焦显微镜活体观察

摘要

目的：应用激光共焦显微镜活体观察水液缺乏性(aqueous tear deficiency，ATD)干眼患者球结膜组织的形态学改变，研究ATD干眼患者的活体病理学特征，提供ATD干眼活体细胞水平的临床诊疗依据。
　　 方法：收集ATD干眼患者30例30眼(含Sjogren’s综合症所致干眼患者2例2眼)，其中男12例，女18例，平均年龄(38.43±11.72)岁；健康志愿者18例22只眼，其中男7例，女11例，平均(37.50±11.87)岁。两组人员在性别(P=0.939)和年龄(P=0.919)上，差异无统计学意义。对所有受检者进行详细病史询问并进行裂隙灯显微镜、泪膜破裂时间、泪液分泌试验、虎红染色各项检查。应用德国海德堡激光共焦显微镜(HRT3)对受检眼的上方、鼻下方、鼻侧、颞侧球结膜进行扫描，分辨率为1μm，激光波长为670 nm，观察视野为400μm×400μm。观察球结膜细胞的形态，对球结膜上皮细胞进行计数，并计算杯状细胞和树突状细胞密度。采用SPSS17.0统计学软件包，P<0.05为差异具有统计学意义。
　　 结果：
　　 1.正常人球结膜表层上皮细胞胞核小，边界模糊。基底上皮细胞边界清晰但胞核不可见。类似杯状细胞的细胞呈卵圆形，胞体较大，细胞内充满高反光均一明亮颗粒，成群或散在分布，上皮表面的孔洞结构可能是已经分泌排出内容物的杯状细胞。树突状细胞呈高反光颗粒，伴树枝状突起，分布于球结膜上皮各层。球结膜基质由密集的白色网状纤维构成，其间可见含有细胞成分的血管穿过。病例组球结膜上皮细胞大小不一，有炎细胞浸润，两组受检者均发现脱屑上皮细胞和微包囊结构，各层细胞形态无明显差异。
　　 2.ATD组的泪液分泌量、泪膜稳定性以及虎红染色较对照组差异具有统计学意义(三者均为P<0.001)。ATD组四个方位球结膜表层上皮细胞、基底上皮细胞、杯状细胞、树突状细胞平均密度分别为(1894±573)个/mm2、(2781±722)个/mm2、(34±27)个/mm2和(83±33)个/mm2；对照组四个方位球结膜表层上皮细胞、基底上皮细胞、杯状细胞、树突状细胞平均密度分别为(2545±688)个/mm2、(2965±398)个/mm2、(79±44)个/mm2、(96±25)个/mm2。经统计学分析，两组间表层上皮细胞密度差异无统计学意义；病例组基底上皮细胞总体密度低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.001)，进一步比较，病例组上方和颞侧细胞密度低于对照组，差异具有统计学意义(上方P<0.01，颞侧P=0.001)；病例组杯状细胞总体密度低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.001)，进一步比较，病例组鼻侧杯状细胞密度低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.001)；病例组树突状细胞总体密度高于对照组，差异具有统计学意义(P=0.001)，对照组上方未检出树突状细胞，进一步比较，病例组鼻侧树突状细胞密度高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.001)。
　　 结论：激光共焦显微镜是在细胞水平活体观察球结膜形态的有力工具。本研究发现ATD患者球结膜基底上皮细胞和杯状细胞减少，树突状细胞增多，本研究首次活体观察并比较了ATD患者球结膜四个部位的细胞数量变化，为干眼病理变化的研究提供了依据。