反复自然流产与精子质量及形态异常关系的探讨

摘要

背景和目的：反复自然流产(recurrent pregnancy loss，RPL)是妇产科常见疾病，发病率约为全部妊娠的2％-5％，患者往往经历多次妊娠和流产，部分患者流产次数高达8-9次，对其身心造成极大地影响，引发再次妊娠的焦躁情绪及恐惧心理，严重时导致婚姻的破裂和家庭的不和，因此对于RPL的病因学研究具有重要的理论意义和实用价值。
　　 研究表明反复自然流产的发病机理十分复杂，除与遗传、解剖、生殖内分泌、感染等因素有关外，仍有部分病因及发病机理不明。目前反复自然流产的病因学研究主要集中于女性因素，认为主要与免疫因素有关，而作为提供胚胎半数基因的男性因素研究较少。胚胎是由卵子和精子受精后发育而成，男子配子构成胚胎基因组成的一半，因此男性因素对于自然流产有着不可忽视的作用。
　　 关于精子本身因素与流产的关系，目前的研究主要涉及精子质量、形态、精子DNA等方面，但尚无一致结论。精子质量主要通过常规精液分析了解精液量、精子密度、及精液中精子的总数量、精子凝集、精子活力与活率、精子形态、精液液化等信息。精子形态是评价男性生育能力的重要指标，研究表明无论在常规精液分析、体外受精.胚胎移植还是在单精子胞浆内注射中，精子形态分析是预测受精成功率的重要的参数指数。为了进一步研究精子质量与形态对于RPL的影响，本文主要通过对于反复自然流产患者的丈夫及正常生育男性进行精液的常规分析及精子形态学分析的检测，并比较两组数值间的差异，为诊断反复性自然流产的病因提供部分理论基础，对RPL的临床诊断、预防治疗及辅助生殖治疗提供新的思路。
　　 材料及方法：
　　 1.实验对象
　　 在2005年1月至2010年10月间在郑州大学第一附属医院妇产科及生殖医学中心就诊的反复自然流产夫妇中选取年龄在22-40岁之间，排除体细胞染色体异常、内分泌、生殖系统解剖异常、免疫学、糖尿病、高血压、生殖道感染等已知的流产的相关因素的患者夫妇作为研究对象62例，取患者丈夫精液为研究组。同时随机抽取生育过健康子女的40例男性精液为对照组.要求两组间年龄无显著性差异，且所选病例资料完整。
　　 2.研究方法
　　 2.1 标本采集禁欲4-7天在取精室手淫法取精于干燥经消毒的洁净广口瓶内，置于37℃水浴箱内使之完全液化后转移至刻度离心管内测量体积，37℃水浴中待查。
　　 2.2 操作方法按WHO的操作方法，分析精液量液化时间、pH值、粘稠度及精子形态等。精液完全液化后，先取一滴约10μl精液滴在载玻片上，拉薄涂片，用改良巴氏染色法染色待检。
　　 2.3 精液形态分析参照世界卫生组织标准，采用国产WLJY-9000型彩色精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析。每份样本分析100个精子，计算形态正常精子率。
　　 2.4 检验指标精液量，pH值，液化时间，精子密度，精子活率，精子活力及分级，正常精子形态。精液形态学指标：将精子分为正常精子和异常精子两大类，异常精子又根据畸形的位置不同分为头部异常、体部异常、尾部异常和混合型异常。
　　 3.统计学方法按统计学要求处理各组参数，使用SPSS17.0统计软件进行统计分析，定量资料均以(x±s)表示，定量资料组间比较采用t检验，定性资料组间比较采用x2检验，P<0.05表示差异具有统计学意义。
　　 结果：
　　 1.精液常规检查：对照组的精液量为2.48±1.07ml，pH值为7.35±0.21，液化时间28.33±7.97s，精子密度为50.46±15.54×106/ml，精子活率60.34±16.32％，精子活力(a+b级)43.19±19.77％，正常精子率70.12±11.25％。研究组的精液量为2.61±1.20ml，pH值为7.28±0.76，液化时间27.56±7.21 s，精子密度为48.67±17.23×106/ml，精子活率42.71±18.38％，精子活力(a+b级)38.33±22.09％，正常精子率32.40±10.21％。结果显示：两组精液的量、pH值、液化时间、精子密度之间的差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比，研究组的精子活率、精子活力、正常精子率均显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05)。
　　 2.精子形态分析：对照组正常形态精子32.07±8.37％，异常精子67.93±8.37％，头部畸形33.05±9.09％，体部畸形7.45±6.12％，尾部畸形10.38±5.28％，混合性畸形14.01±8.32％。研究组正常形态精子25.48±13.20％，异常精子74.52±13.20％，头部畸形33.99±13.49％，体部畸形7.45±5.84％，尾部畸形21.88±4.62％，混合性畸形14.24±8.15％。结果显示：两组精液形态分析中头部畸形精子百分率、体部畸形精子百分率和尾部畸形精子百分率之间的差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比，研究组的异常形态精子百分率、尾部畸形精子百分率率均明显升高，而正常形态精子百分率则明显下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。
　　 结论：
　　 1.反复自然流产患者男性的精子活率降低，精子活力降低，正常形态精子减少。
　　 2.反复自然流产患者丈夫精子形态检验中正常形态精子减少，畸形精子增多，尾部畸形精子百分率明显升高。
　　 因此，在治疗反复自然流产时，可提高精子质量或行精子分离术分离出正常精子，再行辅助生殖技术达到治疗反复性自然流产的目的。