PGE2和IL1-β对体外培养兔子宫韧带成纤维细胞增殖的影响

摘要

研究背景:
　　 盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapsed,POP)是中老年女性临床上越来越常见的一种疾病,指因各种原因引起盆底肌肉、筋膜及子宫韧带的支持功能减弱而导致的女性生殖器官和相邻器官向下移位,常与压力性尿失禁(stress urinaryincontinence,SUI)合并存在,统称女性盆底功能障碍性疾病(female pelvic floordysfunction,FPFD)。PFD可对妇女的生活健康与质量造成严重的影响,多数研究认为,PFD患者盆底结缔组织中所表达的总胶原含量逐步减少,胶原纤维数量也有所降低,这二者导致了盆底各韧带与筋膜等支持结构的松弛,从而引起了PFD的发生,但目前其发生、发展的具体机制仍不十分清楚,研究其发病机制对于PFD的诊断,治疗及预后判断十分重要。
　　 盆腔炎(Pelvic inflammatory disease,PID)是指女性上生殖道的一组感染性疾病,临床上很常见,主要表现为子宫内膜炎(endometritis)、输卵管炎(salpingitis)、输卵管卵巢脓肿(tubo-ovarian abscess,TOA)、盆腔腹膜炎(peritonitis)等。盆腔炎多发生在妇女的性活跃期。如果急性盆腔炎不能得到及时、彻底的治疗,往往会发展为慢性盆腔炎,病情较顽固,并有可能会扩散到子宫韧带等邻近组织或器官,从而导致一系列如女性不孕、输卵管妊娠等后遗症,严重危害女性健康。
　　 炎症介质是一组介导炎症反应的生物活性物质,研究表明,受损韧带在修复过程中,局部会出现来源于不同组织和细胞的炎症因子,前列腺素E2(prostaglandin E2,PGB2)和白细胞介素1-β(interleukin1-β,IL1-β)是介导炎症反应的一种重要炎症介质,在炎症的发生、发展和转归的各个过程中均发挥着极其重要的作用。既往研究表明,前列腺素E2及白细胞介素1-β不仅介导炎症的发生和发展,还对多种细胞的增殖及生物学功能有调节作用。
　　 目的:
　　 通过体外培养兔子宫韧带成纤维细胞,研究前列腺素E2(rostaglandin E2,PGE2)和白细胞介素1-β(interleukin1-β,IL1-β)二者在单一和联合应用时,对体外培养的兔子宫韧带成纤维细胞的增殖有何种影响。
　　 研究方法:
　　 1、利用组织块法体外培养兔子宫韧带成纤维细胞,并通过形态学及免疫组化测定其Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白含量对其进行鉴定。
　　 2、用不同浓度的炎症因子PGE2(25、50、100、500、1000ng/ml)和IL1-β(10、20、50、100、200ng/ml)刺激细胞增殖,以常规培养组为对照,通过MTT法对炎症因子对细胞增殖的作用进行测定。
　　 3应用Excel2003录入数据,以均数士标准差(-x±s)的形式来表示各组数据的平均灰度值,采用SPSS16.0软件包进行数据分的统计分析。采用单因素方差分析法和LSD-t检验法分析各组间资料,检验水准:α=0.05。
　　 结果
　　 1利用组织块法成功在体外培养兔子宫韧带成纤维细胞,该细胞的外在形态与典型的成纤维细胞形态相似,符合成纤维细胞的形态学特征,采用免疫组化方法测定该细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达,其结果符合韧带细胞的特性。
　　 2单独应用时,100 ng/ml的PGE2和20 ng/ml的IL1-β分别为各自最有效的促增殖浓度(P＜0.05);将浓度为100ng/ml的PGE2和20 ng/ml的IL1-β联合应用以刺激子宫韧带成纤维细胞的增殖,该条件下的韧带成纤维细胞增殖活性高于单因子浓度作用组(P＜0.05)。高于各自最适浓度后,PGE2和IL1-β的促增殖作用不再与其浓度成正相关性。
　　 结论
　　 PGE2与IL1-β在适当浓度内单独或联合应用,均能有效的对体外培养的子宫韧带成纤维细胞的增殖起到促进作用,但这种作用并不时刻与炎症因子的浓度成正相关性。