苦杏仁与桔梗止咳、平喘、祛痰的配伍比例和机制研究

摘要

目的:对苦杏仁、桔梗及二者配伍的止咳、平喘、祛痰作用进行系统药效学研究,初步阐明二者配伍的合理性,并进一步明确二者配伍在哪些方面增效以及二者配伍的最佳比例和配伍增效机制,为苦杏仁和桔梗的临床合理应用提供科学依据,丰富中医药理论。
　　 方法:①苦杏仁、桔梗及二者配伍的止咳作用研究:将试验动物分为正常对照组、模型对照组、阳性药组、苦杏仁组、桔梗组以及二者不同配伍比例组;分别采用小鼠氨水引咳法和豚鼠枸橼酸引咳法制备咳嗽模型,观察其咳嗽潜伏期和咳嗽次数;制备卵白蛋白致哮喘豚鼠模型,采用放射免疫法测定血浆中神经源性介质降钙素基因相关肽(CGRP)水平。②苦杏仁、桔梗及二者配伍的平喘作用研究:将试验动物分为正常对照组、模型对照组、阳性药组、苦杏仁组、桔梗组以及二者不同配伍比例组;制备乙酰胆碱合用磷酸组胺致哮喘豚鼠模型,观察哮喘潜伏期;制备卵白蛋白致哮喘豚鼠模型,分别采用放射免疫法、硝酸还原酶法和酶联免疫吸附法(ELISA)测定血液中气道舒缩性介质内皮素(ET)和一氧化氮(NO)水平及可溶性细胞粘附分子-1(ICAM-1)水平,全自动血液分析仪对嗜酸性粒细胞(EOS)和白细胞(WBC)计数,并对肺组织进行病理形态学观察。③苦杏仁、桔梗及二者配伍的祛痰作用研究:将试验动物分为正常对照组、模型对照组、阳性药组、苦杏仁组、桔梗组以及二者不同配伍比例组;采用小鼠酚红排泌法,测定小鼠气道酚红排泌量(OD值);采用大鼠毛细管排痰量法,测定气管的排痰量;制备脂多糖致大鼠肺粘液高分泌模型,采用ELISA法测定肺泡灌洗液(BLAF)中TNF-a和IL-8水平,采用HE染色,镜下观察肺组织形态学变化;采用阿辛蓝.过碘酸雪夫染色(AB-PAS),镜下检测杯状细胞分泌粘蛋白的功能,采用PV-6000二步法免疫组织化学染色(IHC),镜下和定量检测肺气道上皮细胞MUC5AC蛋白的表达。
　　 结果:①苦杏仁、桔梗及二者配伍均能明显延长小鼠和豚鼠咳嗽模型的咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数,抑制卵白蛋白致哮喘豚鼠模型血浆CGRP水平的升高;二者配伍组的上述作用强于单味苦杏仁或单味桔梗,以1:1配伍组作用最强。②苦杏仁、桔梗及二者配伍均能显著延长乙酰胆碱合用磷酸组胺致哮喘豚鼠的潜伏期;明显抑制卵白蛋白致哮喘豚鼠模型血中炎症细胞(EOS和WBC)数量、ET和ICAM-1水平的升高;二者配伍组的上述作用不同程度地强于单味苦杏仁或单味桔梗,以1:2配伍组作用最强。③苦杏仁、桔梗及二者配伍均能显著促进小鼠气管酚红排泌、增加大鼠痰液分泌量:明显改善脂多糖致大鼠肺粘液高分泌模型的气道上皮损伤,减少肺间质内炎症细胞浸润,降低粘蛋白的分泌和下调MUC5AC粘蛋白的表达:显著抑制BLAF中TNF-a和IL-8水平的升高;二者配伍组的上述作用不同程度地强于单味苦杏仁或单味桔梗,以1:2配伍组作用最强。
　　 结论:①苦杏仁、桔梗及二者配伍均具有显著的止咳、平喘、祛痰作用;在止咳、平喘、祛痰作用上,苦杏仁和桔梗均有配伍增效作用。②二者配伍用于止咳的最佳配伍比例是1:1;用于平喘和祛痰的最佳配伍比例均是1:2。③苦杏仁和桔梗在止咳方面的配伍增效作用表现为:延长咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数及降低神经源性介质(CGRP)的作用强于单味苦杏仁或单味桔梗。④苦杏仁和桔梗在平喘方面的配伍增效作用表现为:延长哮喘潜伏期、减少炎性细胞的数量和分泌、降低收缩性介质(ET)和炎症因子(ICAM-1)水平的作用强于单味苦杏仁或单味桔梗。⑤苦杏仁和桔梗在祛痰方面的配伍增效作用表现为:增加气管的排泌功能和痰液的分泌量、减少炎性细胞及炎症介质的数量和分泌、减少肺泡中粘蛋白的分泌及下调粘蛋白MUC5AC蛋白的表达强于单味苦杏仁或单味桔梗。