190对同卵(n=147)和异卵(n=43)双胞胎胃体、胃窦黏膜组织病理学结果比较

摘要

1研究背景与目的：
　　 食管癌(Esophageal cance,EC)是全世界最为常见的六种恶性肿瘤之一,显著的地域性分布差异是食管癌最为突出的流行病学特征。贲门癌(Gastric cardiaadenocarcinoma,GCA)在地域上有着与食管癌相似的分布特征。中国是世界上食管/贲门癌的发病率和死亡率最高的国家,尤其是河南、河北及山西三个省份相交界的太行山地区,是中国,也是世界上食管/贲门癌的发病率和死亡率最高的地区之一。说明环境因素在食管/贲门癌的发生发展中有着不可忽视的作用。而在这些地区食管/贲门癌的发生又有着突出的家族聚集现象,提示着在食管/贲门癌的发生发展中遗传因素可能也起着重要作用。
　　 双胞胎(Twins)可分为同卵双胞胎(Monozygotis twins,MZ)和异卵双胞胎(Dizygotis twins,DZ)两类。同卵双胞胎指两个胎儿由同一个受精卵发育而成,双胞胎两位成员的基因型完全相同;而异卵双胞胎则是由同时受精的两个不同的受精卵发育而成,双胞胎两位成员的基因型部分(50％)相同。由于双胞胎所具有的特殊遗传背景,有助于排除年龄和环境所带来的偏倚,对阐明环境和遗传因素在上消化道肿瘤中的交互作用有积极意义。
　　 本研究通过对河南食管/贲门癌高发区无症状双胞胎进行流行病学调查、卵型鉴定、胃镜检查和组织病理学检查,对比分析胃黏膜肉眼形态改变及组织病理学变化,探讨遗传因素和环境因素对胃癌前病变和癌发生的影响。
　　 2材料与方法：
　　 2.1研究对象
　　 本研究中所用的双胞胎病例,均来自河南食管/贲门癌高发区(林州、安阳、鹤壁南阳、平顶山等地区),排除单个接受检查的双胞胎,共有190对资料齐全的双胞胎入选,且190对双胞胎两位成员均接受了胃镜检查。190对双胞胎中男性104对,年龄33～71岁,平均年龄50±2岁;女性86对,年龄34～76岁,平均年龄52±2岁。同卵双胞胎147对,异卵双胞胎43对。
　　 2.2调查方法
　　 本研究小组经过高发区大规模现场普查、入户面谈调查和电话随访,与接受调查的双胞胎两位成员签订知情同意书,并完成双胞胎健康调查登记表。主要调查内容包括:一般资料、疾病史、个人生活习惯、一般体格检查、实验室检查、双胞胎家族史等。对肿瘤患者特别是食管/贲门/胃癌患者,仔细询问肿瘤家族史并绘制家系图。然后对双胞胎两人进行指纹检查,并对每位双胞胎成员抽取空腹外周静脉血5ml(EDTA-K2抗凝),分装成2管,深低温(-40℃/-80℃)冰箱保存备用。最后,对每位双胞胎成员进行胃镜检查并取黏膜活检。
　　 2.3纤维内镜检查
　　 对190例双胞胎进行食管、胃、十二指肠检查,分别在食管中段、食管下段、贲门、胃体和胃窦部各取活检2块,并在肉眼可见的病变部位随机取材。钳取的黏膜组织一块迅速置于85%酒精固定,一块置于-80℃低温冰箱冷冻储存。
　　 2.4双胞胎卵型鉴定
　　 190对双胞胎的卵型鉴定采用2种方法对进行。其中,116对采用ABO血型鉴定、相似程度与问卷调查相结合的相似诊断法,另外74对则提取全血DNA后采用短串联重复序列(Short tandem repeat,STR)测定,这种方法又称为微卫星DNA基因分型技术,此方法可以在基因组水平上直接判别一对双胞胎的卵型,是一种准确、高效、可靠的卵型鉴定方法,被用作双胞胎卵型鉴定的“金标准”。
　　 2.5组织病理学诊断
　　 根据胃体、胃窦黏膜上皮细胞形态结构和组织结构的改变情况,将胃体、胃窦黏膜上皮病变分为正常(Normal tissue,NOR)、慢性浅表性胃炎(Chronicsuperficial gastritis,CSG)、慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)、肠上皮化生(Intestinal metaplasia,IM)和不典型增生(Dysplasia,DYS)等。并且,所有的HE组织切片均经过至少两位病理学专家确诊。
　　 2.6统计学处理
　　 本研究中的所有数据结果均采用SPSS19.0统计软件进行统计分析,运用卡方检验(Chi-square test),比较190对双胞胎卵型鉴定结果,胃体、胃窦黏膜活检组织病理学诊断结果及胃镜诊断结果和组织病理学诊断结果是否具有一致性。检验的显著性水准取α=0.05,且P<0.05时判定统计结果有显著性意义。
　　 3结果：
　　 3.1双胞胎卵型鉴定结果
　　 应用相似诊断法,可以将116对双胞胎分为95对同卵双胞胎和21对异卵双胞胎,而使用基因诊断法的另外74对双胞胎则分为52对同卵双胞胎和22对异卵双胞胎。卡方检验的计算结果显示两种鉴定方法的结果无统计学差异(x2=3.488,P=0.062,P>0.05)。
　　 3.2胃体、胃窦黏膜活检组织病理检查结果
　　 胃体部均取到活检组织的双胞胎有71对,排除仅一人取活检或活检组织过小无法诊断的119对双胞胎,组织病理学诊断结果显示:NOR检出63例,双胞胎两人胃体黏膜均正常19对,其中男性9对,女性10对,同卵15对,异卵4对,一人正常另一人为其他病变25对;CSG检出72例,双发20对,其中男性14对,女性6对,同卵15对,异卵5对,单发32对;CAG检出4例,均为单发,其中同卵3对,异卵1对;IM和DYS各检出2例,均为单发、同卵。
　　 胃窦部均取到活检组织的双胞胎有142对,排除仅一人取活检或活检组织过小无法诊断的48对双胞胎,组织病理学诊断显示:NOR检出53例,双胞胎两人胃窦黏膜均正常10对,其中男性、女性各5对,同卵8对,异卵2对,一人正常另一人为其他病变33对;CSG检出178例,双发66对,其中男性35对,女性31对,同卵49对,异卵17对,单发46对;CAG检出39例,双发9对,其中男性3对,女性6对,同卵6对,异卵3对,单发21对;IM检出39例,双发10对,其中男性2对,女性8对,同卵、异卵各5对,单发19对;DYS检出28例,双发3对,均为同卵,其中男性1对,女性2对,单发22对。
　　 3.3胃体、胃窦黏膜活检组织病理结果总一致率比较
　　 胃体部黏膜组织活检病理学结果一致率男性为65.7%(23/35),女性为44.4%(16/36),总一致率为54.9%(39/71);胃窦部一致率男性为62.0%(44/71),女性为59.2%(42/71),总一致率为60.6%(86/142);胃体和胃窦部不同性别间胃黏膜活检组织病理学结果一致率差异无统计学意义(x2胃体=3.243,P=0.072,P>0.05;x2胃窦=0.118,P=0.731,P>0.05.)。胃体和胃窦部黏膜组织活检病理结果总一致性差异无统计学意义(x2胃体vs胃窦=0.620,P=0.431,P>0.05)。
　　 胃体部黏膜组织活检病理学结果一致率同卵为53.6%(30/56),异卵为60.0%(9/15),总一致率为54.9%(39/71);胃窦部一致率同卵为60.7%(65/107),异卵为62.9%(22/35),总一致率为61.3%(87/142);胃体和胃窦部不同卵型间胃黏膜活检组织病理学结果一致率差异无统计学意义(x2胃体=0.197,P=0.675,P>0.05;x2胃窦=0.049,P=0.824,P>0.05)。胃体和胃窦部组织活检病理学结果总一致性差异无统计学意义(x2胃体vs胃窦=0.787,P=0.375,P>0.05)。
　　 3.4胃镜检查与病理组织学检查结果一致率比较
　　 190对接受胃镜检查的双胞胎,排除未取活检或活检组织过小无法诊断者,胃镜检查结果为NOR的双胞胎中,病理组织学检查检出NOR为22例,检出CSG为42例,检出CAG为12例;胃镜检查结果为CSG的双胞胎中,检出NOR为32例,检出CSG为124例,检出CAG为26例;胃镜检查结果为CAG的双胞胎中,检出CSG为4例,检出CAG为2例。统计结果显示,胃镜检查与病理组织学检查结果不具有一致性(x2=0.110,P=0.019,P<0.05)。
　　 4结论：
　　 双胞胎两位成员之间在胃窦、胃体部黏膜各种病变的一致性较低,提示遗传因素可能是胃癌前病变和癌发生发展中的易感因素,环境因素可能起着重要的主导作用。