弥漫大B细胞淋巴瘤CD5、COX-2表达和bc1-6基因相关染色体易位及其意义

摘要

背景与目的:
　　弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）是NHL中发病率最高的类型，约占NHL的30％～40％。目前DLBCL病因尚不明确，多为原发，也可能为继发，如其可由低侵袭性的滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma，FL)转化而来。DLBCL的发生可能与免疫缺陷、自身免疫以及病毒感染等因素有关。尽管在WHO的分类中，DLBCL被归为一类独立的淋巴瘤，但其在治疗以及预后上都存在着明显的异质性，而且在临床化疗中发现仅有一半左右的患者的病情能得到缓解。这些证据均提示DLBCL可能存在不同的亚型。DLBCL的基因和免疫学亚分型对其病理诊断、临床治疗以及评估预后等方面都具有重要意义。最新的WHO淋巴造血系统肿瘤分类将DLBCL分成不少于15种亚型。2004年Hans等以基因芯片为基础采用免疫组织化学法将DLBCL分为生发中心细胞样型(germinal center B-cell-like，GCB)和非发生中心样型（non-germinal center B-cell-like，非GCB）。这两种分型对研究DLBCL患者的预后，具有较大的临床指导意义。2008年WHO淋巴和造血组织肿瘤分类方案中，对DLBCL建议用Hans免疫组织化学方法进行。
　　CD5蛋白:近年来的大量研究表明，约10％的DLBCL患者可以表达CD5，其中多数为老年女性，且通常为原发;CD5阳性的DLBCL患者临床病理形态表现为中心母细胞性、免疫母细胞性或者富于T细胞性，其中大多数(80％以上）为非GCB细胞样型DLBCL。近年来有研究表明原发CD5阳性的DLBCL患者，根据临床病理形态和遗传学分析，应该归属于一类独立的DLBCL亚型。也有研究报道，CD5阳性的DLBCL患者预后相对于CD5阴性患者要差。CD5表达是否能拥有上述作用是值得进一步研究的问题。
　　COX-2蛋白:环氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)是前列腺素（prostaglandin，PG）合成过程中的一种限速酶，感染、紫外线、化学损伤等因素都可能诱导其表达，COX-2的催化产物具有一定的促炎、抗细胞凋亡等作用，有利于恶性肿瘤的发生、发展、侵袭以及转移。COX-2在多种恶性肿瘤组织中均异常增高表达，且被认为与相关疾病的不良预后有关，在淋巴瘤患者中也有类似的相关报道，但在DLBCL中的作用尚需深入研究。
　　Bcl-6蛋白:bcl-6基因主要在生发中心B细胞中表达。Bcl-6蛋白是核内转录因子，是锌指蛋白的一种，主要参与淋巴细胞的发育调节、分化调节以及细胞周期的调控等方面，正常B细胞的成熟以及淋巴滤泡生发中心的形成中Bcl-6蛋白都起着重要的作用。Bcl-6基因高表达的患者生存率较高，因此Bcl-6蛋白的表达水平越高患者预后越好，被认为对DLBCL患者治疗起到积影响的因素。而另有研究结果显示bcl-6基因发生突变与患者各临床指标间的相关性无统计学意义。因此Bcl-6的作用还有待进一步研究。
　　综合上述，在本研究中拟在DLBCL中研究CD5、COX-2的蛋白表达和bcl-6基因相关染色体易位的发生情况以及其与DLBCL不同免疫表型之间的关系和对预后的影响，并进一步探讨三者与DLBCL患者各临床病理因素之间的关系。
　　材料与方法:
　　1、回顾性分析2003年1月至2008年1月平煤神马医疗集团总医院病理诊断中心收集的诊断明确、临床资料齐全的160例DLBCL石蜡标本资料，所有病例均采用Hans法进行免疫分型，分为生发中心细胞样型（GCB细胞样）和非生发中心细胞样型（非GCB细胞样）;
　　2、采用免疫组化方法检测石蜡组织标本中的CD10、Bcl-6、MUM1、CD5、COX-2、Bcl-2、P-糖蛋白(P-gp)和Ki67表达情况;
　　3、使用荧光原位杂交技术(FISH)检测石蜡组织标本中bcl-6基因相关易位的情况;
　　4、所有数据均采用SPSS13.0软件进行统计学分析。应用X2检验比较CD5表达与不同临床特征及病理亚型之间的关系;单因素生存分析采用Kaplan-Meier分析和log-rank检验，生存分析采用寿命表发进行分析。Ki67表达为特殊计量资料，采用两独立样本的t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。
　　结果:
　　1、160例DLBCL中，GCB细胞样型59例(36.8％)，非GCB细胞样型101例(63.2％)。
　　2、160例DLBCL病例中，CD5阳性者23例(23/160，14.3％)，CD5阳性DLBCL患者年龄≥60岁的发病比例(16/23，69.5％)显著高于CD5阴性表达者(48/137，35.0％);CD5阳性患者2个及2个以上结外受累比例(15/23，65.2％)显著高于CD5阴性者(42/137，30.7％);CD5表达的患者因DLBCL而导致死亡的比例(16/23，69.6％)显著高于CD5不表达患者因DLBCL而死亡(50/137，35.8％)。应用Kaplan-Meier进行单因素生存分析，结果显示CD5阳性患者总生存期显著低于CD5阴性患者，CD5阳性表达的患者无事件生存期(EFS)显著低于CD5不表达者。
　　3、COX-2阳性率为21.8％（35/160），其中35例均发生在非GCB细胞样型(P=0.156);COX-2阳性及阴性患者中位生存时间分别为23个月50个月;COX-2阳性的患者1年和5年生存率分别为57.64％和23.79％，COX-2阴性的患者1年和5年生存率分别为92.14％和39.68％，二者差异均有显著性(P=0.034)。COX-2阳性的DLBCL患者的组织标本中P-gp的阳性率比显著高于COX-2阴性者(P=0.039);同时COX-2阳性DLBCL患者的组织标本中Bcl-2的阳性率显著高于COX-2阴性者(P=0.007);COX-2阳性的DLBCL患者的组织标本中Ki67的表达百分比与COX-2阴性者的差别不具有计学意义（P=0.109）;
　　4、bcl-6基因相关易位阳性率45.6％(73/160)，其中GCB细胞样型的Bcl-6基因相关易位阳性率33.9％(20/59)，非GCB细胞样型的bcl-6基因相关易位阳性率为52.5％(53/101)，非GCB细胞样型的bcl-6基因相关易位阳性率显著高于GCB细胞样型(P＜0.05);GCB细胞样型中bcl-6基因相关易位情况与Ki67的蛋白表达情况无相关性，非GCB细胞样型中bcl-6基因相关易位与Ki67表达情况也没有相关性(P＞0.05)。
　　结论:
　　1、CD5、COX-2阳性表达可能为判断DLBCL患者预后不良的因素，并有可能成为新的治疗靶点;
　　2、CD5阳性或COX-2阳性DLBCL有望被定为新的独立亚型;
　　3、bcl-6基因相关易位在一定程度上也提示DLBCL患者不良预后。

目录

声明

摘要

中英文缩略词

前言

材料与方法

1 材料

2．实验方法及步骤

3．实验结果判读

4．统计学方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 弥漫大B淋巴瘤中相关蛋白表达研究现状

个人简历、在学期间发表的学术论文

致谢