神经钙粘素在多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞中的表达及临床意义

摘要

背景与目的：
　　多发性骨髓瘤是血液系统的恶性肿瘤，以骨髓内异常的浆细胞恶性增殖并产生大量的免疫球蛋白、骨质破坏、贫血、肾功能损害等为主要临床表现。在多发性骨髓瘤的发病机制中，粘附分子的作用越来越受重视。粘附分子是调节细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间相互作用的膜表面糖蛋白，它所介导的骨髓微环境的改变与肿瘤的发生、浸润及转移相关。多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞相互作用，使粘附分子如NCAM、ICAM-1、VLA-4、CD44和CD56等表达增多，从而进一步调节骨髓瘤细胞的增殖、分化和迁移。神经钙粘素（N-Cadherin, N-Cad）是细胞粘附分子家族中的成员，在CD抗原中命名为CD325，它编码的基因为CDH2。它通过Ca2+介导的造血干细胞和骨髓基质细胞之间同型分子的粘附作用参与维持造血干细胞的干细胞特性和自我更新潜能，进而维持造血干细胞池的大小。并且神经钙粘素在许多上皮癌及血液系统肿瘤中异常表达，如乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、食道癌、成人T淋巴细胞白血病、T细胞淋巴瘤及急性髓系白血病如M1、M2、M4、M5等，并且与上述疾病的预后相关。但神经钙粘素与多发性骨髓瘤的相关研究迄今仍较少，研究报道神经钙粘素在约50％的多发性骨髓瘤患者的恶性浆细胞中表达，且参与介导骨髓瘤细胞与成骨细胞之间的粘附作用，抑制成骨细胞的分化，增强了溶骨活性，导致骨质疏松，在多发性骨髓瘤骨病的发病机制中起了重要作用；并且神经钙粘素还参与了骨髓瘤细胞的迁移和归巢。此外，研究发现神经钙粘素参与调节骨髓瘤干细胞池的自我更新。本研究主要探讨神经钙粘素在多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞中的表达及其临床意义。
　　材料和方法：
　　研究对象为2011年8月至2014年8月在我院诊断和治疗的多发性骨髓瘤患者64例。所有病例的诊断均符合张之南等主编的《血液病诊断和疗效标准》第3版。用流式细胞术检测多发性骨髓瘤患者骨髓细胞N-Cadherin的表达情况。分别抽取多发性骨髓瘤患者骨髓液，用四色荧光流式细胞仪检测多发性骨髓瘤患者CD38+/CD138+细胞表面N-Cadherin的表达水平。主要单克隆抗体有:CD45、CD38、CD138、CD325、CD117、CD56。用荧光原位杂交法检测多发性骨髓瘤患者骨髓细胞1q21扩增、RB1缺失、D13S319缺失、p53缺失和IGH重排。分析骨髓瘤细胞 N-Cadherin的表达与患者临床特征、疾病分期及预后的关系。所得数据经SPSS17.0统计学软件处理。
　　结果：
　　① N-Cadherin在多发性骨髓瘤患者中的表达:多发性骨髓瘤患者骨髓CD38+/CD138+细胞N-Cadherin（CD325）的表达明显分为两群，47例（73.44%）患者骨髓CD38+/CD138+细胞N-Cadherin（CD325）的表达＜20%，为低表达组，17例（26.56%）患者骨髓CD38+/CD138+细胞N-Cadherin的表达＞20%，为高表达组。
　　② N-Cadherin高表达组1q21扩增阳性率为42.86%，低表达组1q21扩增阳性率为13.64%，两组间差异有统计学意义（p＜0.05）；而两组间RB1缺失、D13S319缺失及IGH重排检出率均无统计学差异；低表达组有1例p53缺失阳性。
　　③ N-Cadherin高表达与低表达患者初诊时年龄、血红蛋白、血清白蛋白、球蛋白、肌酐、β2-MG、乳酸脱氢酶、血钙、C反应蛋白、血沉水平方面的差异均无统计学意义（p＞0.05）；
　　④ N-Cadherin高表达与低表达患者在疾病的分期、分型、骨髓瘤细胞 CD56、CD117表达、骨质破坏方面的差异均无统计学意义（p＞0.05）；
　　⑤ N-Cadherin高表达和N-Cadherin低表达患者平均总体生存时间（OS）分别为26.7月和55.5月，两组间差异有统计学意义（p=0.03）。
　　结论：
　　神经钙粘素高表达可能是多发性骨髓瘤预后不良的指标之一，这可能与1q21扩增有关。

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引言

材料与方法

1 病例资料

2 设备及试剂

3 实验方法

3.1 流式细胞术检测N-Cadherin的表达

3.2 荧光原位杂交检测（Fluorescence in stu hybridization, FISH）

3.3 统计学处理

结果

1 N-Cadherin在多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞中的表达

2 N-Cadherin的表达与临床资料的相关性

2.1 与临床预后相关资料的分析

2.2 与临床分期、分型的关系

2.3 与骨髓瘤细胞免疫分型的关系

2.4 与分子遗传学的关系

2.5 与骨质破坏的关系

2.6 与凝血功能的关系

2.7 与患者疾病总体生存时间的关系

讨论

结论

参考文献

综述 多发性骨髓瘤预后相关因素研究进展

致谢

个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果