利拉鲁肽在高糖环境下对体外培养的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和凋亡的影响

摘要

背景：骨质疏松作为糖尿病的一种慢性并发症，随着糖尿病患病率增加，糖尿病骨质疏松的患病率也逐年增加。在治疗糖尿病的同时也要对骨质疏松进行治疗。研究发现部分降糖药物在降低血糖的同时也对骨代谢产生影响。胰高糖素样肽1(glucagon-likepeptide-1，GLP-1)类似物作为一种新型的降糖药物，广泛用于临床，其不仅具有降糖作用，还有胰腺外作用。GLP-1对小鼠成骨细胞的影响，目前国内外报道少见。
　　目的：研究不同浓度 GLP-1类似物-利拉鲁肽在高糖环境下对小鼠前成骨细胞株MC3T3-E1增殖、分化及凋亡的影响。
　　方法：⑴选用传代小鼠前成骨细胞株MC3T3-E1，给予16.5 mmol/L高糖培养基培养，应用不同浓度的利拉鲁肽（10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L）处理培养的成骨细胞48h，同时设立对照组（利拉鲁肽0 mol/L），采用CCK-8比色法检测成骨细胞增殖率、流式细胞仪检测细胞凋亡率、实时荧光定量PCR法检测成骨细胞分化标志物COL-Ⅰ、ALP和OPN基因的表达，Western blots检测凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein，Bax）和抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病基因-2（B-cell lymphoma/lenkemia-2，Bcl-2）的表达。⑵数据用xˉ±s表示，采用SPSS l7.0统计分析软件对实验数据进行分析,多组总体比较采用单因素方差分析(One-way ANOVE)，组间两两比较采用LSD-t检验。检验水准α=0.05。
　　结果：①与对照组相比，利拉鲁肽干预组（10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L）细胞增殖率均显著高于对照组（P<0.05），以10-8 mol/L利拉鲁肽促进成骨细胞增殖的作用最显著。②与对照组相比，利拉鲁肽干预组Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶和骨桥蛋白的mRNA表达量明显增加（P<0.05），在10-8 mol/L浓度组表达量增加最明显。③与对照组相比，不同浓度利拉鲁肽干预组成骨细胞早期凋亡率明显降低(P<0.05)，组间两两比较差异具有统计学意义，且在10-8 mol/L浓度下凋亡率最低。④与对照组相比，利拉鲁肽干预组抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增多，且随着利拉鲁肽浓度增高，Bcl-2蛋白表达呈递增趋势，组间两两比较差异具有统计学意义。与对照组相比，利拉鲁肽干预组促凋亡蛋白Bax表达明显降低，且随着利拉鲁肽浓度增高，Bax蛋白表达呈递减趋势，组间两两比较差异具有统计学意义。
　　结论：在一定浓度范围内利拉鲁肽在高糖环境下能够促进小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化，抑制其凋亡。

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中英文缩略词表

引言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学处理

结果

1 利拉鲁肽在高糖环境下对小鼠成骨细胞增殖的影响

2 利拉鲁肽在高糖环境下对小鼠成骨细胞分化的影响

3 利拉鲁肽对小鼠成骨细胞MC3T3-E1 凋亡的影响

4 利拉鲁肽对成骨细胞Bcl-2、Bax蛋白的影响

讨论

结论

参考文献

综述:糖尿病与骨质疏松症研究进展及防治

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