超声靶向微泡破坏对PEX基因转染鼠胶质瘤C6细胞影响的实验研究

摘要

目的
　　（1）采用声诺维（SonoVue）联合超声辐照介导PEX基因转染鼠胶质瘤C6细胞，旨在探讨其可行性以及PEX基因对鼠胶质瘤C6细胞的影响。
　　（2）将超声靶向微泡破坏与脂质体联合来增强 PEX基因在鼠胶质瘤 C6细胞的转染，旨在探讨超声靶向微泡破坏增强脂质体转染的可行性及优势所在。
　　方法
　　（1）体外生长良好的鼠胶质瘤C6细胞经0.25％胰酶消化计数后，按照2×105/孔的密度接种于6孔板，分为空白对照组、超声+微泡组、质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组、质粒+超声+微泡组。超声辐照参数为频率1MHz、辐照功率1.0W/cm2、持续时间30s、占空比20％。各组分别相应处理后继续培养24h，应用荧光显微镜观察各组细胞增强型绿色荧光蛋白（Enhance green fluorescent protein,EGFP）的表达情况、流式细胞仪检测各组荧光细胞比例以此来评估基因转染率、逆转录PCR检测细胞中PEX mRNA的表达量、流式细胞仪分析细胞周期的分布。
　　（2）体外培养的鼠胶质瘤C6细胞按照实验要求可分为对照组、微泡组、超声组、超声+微泡组、脂质体组、超声+微泡+脂质体组。经过相应的处理,24 h后应用荧光显微镜观察EGFP的表达、流式细胞仪检测基因转染率。
　　结果
　　（1）质粒+超声+微泡组：荧光显微镜下表达绿色荧光的细胞最多，流式细胞仪检测基因转染率最高，逆转录PCR可见特异性PEX电泳条带高表达，流式细胞仪分析细胞周期分布G0/G1期百分数明显升高，与其他各组细胞相比，上述差异均有统计学意义(P均＜0.05)。
　　（2）荧光显微镜下，超声+微泡+脂质体组可见大量 EGFP表达，明显多于其他各组；流式细胞仪检测转染率，超声+微泡组为(8.59±1.94)%，脂质体组为(13.71±2.99)%，明显高于前者，差异有统计学意义（P＜0.05）；超声+微泡+脂质体组为(18.31±2.66)%，明显高于其他各组，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。
　　结论
　　（1）声诺维联合超声辐照可增强PEX基因在鼠胶质瘤C6细胞中的转染；体外实验中，PEX基因可通过影响细胞周期来抑制鼠胶质瘤C6细胞的增殖。
　　（2）超声靶向微泡破坏可增强脂质体介导PEX基因在鼠胶质瘤C6细胞中的转染。

目录

声明

中英文缩略语对照表

前言

第一部分 超声靶向微泡破坏增强PEX基因转染鼠胶质瘤C6细胞的实验研究

1 引言

2 材料与方法

3 实验结果

4 讨论

5 小结

第二部分 超声靶向微泡破坏联合脂质体增强PEX基因转染鼠胶质瘤C6细胞的体外实验

1 引言

2 材料与方法

3 实验结果

4 讨论

5 小结

参考文献

综述:超声靶向微泡破坏技术在脑胶质瘤靶向治疗中的研究进展

个人简历和研究生阶段科研经历与成果

致谢