pHGF对脑缺血再灌注大鼠bcl-2、p53表达的影响

摘要

目的：研究促肝细胞生长因子(pHGF)对脑缺血再灌注损伤神经元凋亡及bcl-2、p53蛋白表达的影响，探讨pHGF对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制，为临床应用pHGF治疗缺血性脑血管病提供实验理论依据。 方法：将健康雄性Wistar大鼠36只随机分为缺血对照组和pHGF治疗组，再根据观察时间点不同随机分为缺血2h再灌注6h、12h、24h三个亚组。采用改良线栓法建立大鼠MCAO缺血再灌注模型，再灌注开始时pHGF治疗组各组大鼠腹腔注射pHGF(50mg/kg，1ml)，缺血对照组各组大鼠腹腔注射1ml生理盐水。于各观察时间点处死大鼠取脑组织制切片，应用免疫组化法和TUNEL染色法分别进行bcl-2、p53蛋白及凋亡细胞检测。 结果： 1.TUNEL染色结果光镜下观察到TUNEL染色凋亡阳性细胞染色为褐色圆形或椭圆形实心小体。实验各组均有阳性细胞表达，各时间点，pHGF治疗组凋亡细胞数与缺血对照组比较显著减少，差异具有显著性(P＜0.01)。 2.免疫组化检测结果 ①bcl-2蛋白检测结果：光镜下观察到缺血皮层bcl-2阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于胞膜，也有部分胞浆着色；而且bcl-2阳性细胞结构清晰，形态基本正常。实验各组均有阳性细胞表达，各观察时间点，pHGF治疗组bcl-2阳性细胞数均明显多于缺血对照组，且差异具有显著性(P＜0.01)。 ②p53蛋白检测结果：光镜下观察到缺血皮层p53阳性细胞染成棕黄色，而且p53阳性细胞明显肿胀，形态不规则，受损较重；各组均有阳性细胞表达，各观察时间点，pHGF治疗组阳性细胞数均明显少于缺血对照组，且差异具有显著性(P＜0.05)。 结论： 1.pHGF能抑制脑缺血再灌注损伤神经元凋亡。 2.其抗凋亡机制可能与上调bcl-2蛋白及下调p53蛋白表达有关。

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