声明
摘要
符号说明
1 前言
1.1表观遗传学
1.2染色质结构
1.3 DNA甲基化
1.4组蛋白共价修饰
1.4.1组蛋白的乙酰化
1.4.2组蛋白的磷酸化
1.4.3组蛋白的甲基化
1.4.4组蛋白的其他修饰方式
1.5 LSD1
1.5.2 LSD1对基因转录的作用
1.5.3 LSD1在癌症发生发展中的作用
1.6.1 Wnt信号通路的传导与功能
1.6.2 Wnt信号通路与EMT过程
1.6.3 Wnt3a与癌症
1.7本课题的研究目的和研究内容
2 Wnt3a和LSD1、EMT相关蛋白在胃癌组织中表达量的相关性分析
引言
2.1 实验材料
2.1.1实验仪器
2.1.2实验试剂
2.1.3常用溶液配制
2.2实验方法
2.2.1组织芯片制备
2.2.2免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)
2.2.3统计分析
2.3实验结果
2.3.1 Wnt3a和LSD1在胃癌组织中表达的相关性分析
2.3.2男性来源胃癌组织中Wnt3a和LSD1、EMT相关蛋白表达呈正相关
小结
3 胃癌细胞中Wnt3a介导LSD1调控Wnt/β-catenin通路的机制研究
引言
3.1 实验材料
3.1.1 实验仪器
3.1.2实验试剂
3.2实验方法
3.2.1细胞复苏、传代以及冻存
3.2.2蛋白质的提取
3.2.3 蛋白BCA定量
3.2.4 Western blot实验
3.2.5 Elisa检测Wnt3a分泌实验
3.2.6总RNA的提取以及反转录实验
3.2.7 RT-qPCR
3.2.8免疫组化
3.3实验结果
3.3.1 男性来源胃癌细胞MGC-803中LSD1正向调控Wnt3a分泌
3.3.2男性来源胃癌细胞MGC-803中LSD1敲低后诱导PORCN介导的Wnt/β-catenin通路失活
3.3.3 LSD1敲低对于胃癌细胞MGC-803在体内Wnt/β-catenin通路的影响
小结
4 LSD1对Wnt/β-catenin通路介导MGC-803侵袭和转移的调控能力研究
引言
4.1 实验材料
4.1.1实验仪器
4.1.2实验试剂
4.2实验方法
4.2.1划痕实验
4.2.2 Transwell实验
4.2.3 Western blot实验
4.2.4小动物活体成像实验
4.2.5苏木精-伊红染色法
4.2.6 免疫组化
4.3实验结果
4.3.2 LSD1通过Wnt/β-catenin通路促进MGC-803体内的转移和EMT
小结
结论
参考文献
个人简历与研究成果
致谢
郑州大学;