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【6h】

LSD1以性别特异性方式激活Wnt通路促进胃癌细胞侵袭和迁移

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摘要

符号说明

1 前言

1.1表观遗传学

1.2染色质结构

1.3 DNA甲基化

1.4组蛋白共价修饰

1.4.1组蛋白的乙酰化

1.4.2组蛋白的磷酸化

1.4.3组蛋白的甲基化

1.4.4组蛋白的其他修饰方式

1.5 LSD1

1.5.2 LSD1对基因转录的作用

1.5.3 LSD1在癌症发生发展中的作用

1.6.1 Wnt信号通路的传导与功能

1.6.2 Wnt信号通路与EMT过程

1.6.3 Wnt3a与癌症

1.7本课题的研究目的和研究内容

2 Wnt3a和LSD1、EMT相关蛋白在胃癌组织中表达量的相关性分析

引言

2.1 实验材料

2.1.1实验仪器

2.1.2实验试剂

2.1.3常用溶液配制

2.2实验方法

2.2.1组织芯片制备

2.2.2免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)

2.2.3统计分析

2.3实验结果

2.3.1 Wnt3a和LSD1在胃癌组织中表达的相关性分析

2.3.2男性来源胃癌组织中Wnt3a和LSD1、EMT相关蛋白表达呈正相关

小结

3 胃癌细胞中Wnt3a介导LSD1调控Wnt/β-catenin通路的机制研究

引言

3.1 实验材料

3.1.1 实验仪器

3.1.2实验试剂

3.2实验方法

3.2.1细胞复苏、传代以及冻存

3.2.2蛋白质的提取

3.2.3 蛋白BCA定量

3.2.4 Western blot实验

3.2.5 Elisa检测Wnt3a分泌实验

3.2.6总RNA的提取以及反转录实验

3.2.7 RT-qPCR

3.2.8免疫组化

3.3实验结果

3.3.1 男性来源胃癌细胞MGC-803中LSD1正向调控Wnt3a分泌

3.3.2男性来源胃癌细胞MGC-803中LSD1敲低后诱导PORCN介导的Wnt/β-catenin通路失活

3.3.3 LSD1敲低对于胃癌细胞MGC-803在体内Wnt/β-catenin通路的影响

小结

4 LSD1对Wnt/β-catenin通路介导MGC-803侵袭和转移的调控能力研究

引言

4.1 实验材料

4.1.1实验仪器

4.1.2实验试剂

4.2实验方法

4.2.1划痕实验

4.2.2 Transwell实验

4.2.3 Western blot实验

4.2.4小动物活体成像实验

4.2.5苏木精-伊红染色法

4.2.6 免疫组化

4.3实验结果

4.3.2 LSD1通过Wnt/β-catenin通路促进MGC-803体内的转移和EMT

小结

结论

参考文献

个人简历与研究成果

致谢

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