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缩略词表
第一章 文献综述
1.1 猪圆环病毒的发现
1.2 PCV的分类
1.2.1 1型猪圆环病毒PCV1
1.2.2 2型猪圆环病毒PCV2
1.2.3 3 型猪圆环病毒PCV3
1.3 猪圆环病毒2型分子生物学特征
1.4 猪圆环病毒2型的免疫调节
1.5 PCV2的诊断方法
1.5.1 病毒的分离与鉴定
1.5.2 血清学检测
1.5.3 分子生物学诊断技术
1.6 PCV2疫苗研究现状
1.7 CHO真核表达体系
1.8 研究目的及意义
第二章 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达
2.1 实验材料
2.1.1 细胞与载体
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制
2.1.4试验仪器
2.1.5 引物设计及合成
2.2 实验方法
2.2.1 pEE12.4-PCV2-Cap重组质粒的构建
2.2.2 无内毒素质粒提取和质粒线性化处理
2.2.3 pEE12.4-PCV2-Cap转染CHO-K1细胞
2.2.4 细胞株悬浮培养及摇瓶发酵
2.2.5 蛋白纯化与动物免疫
2.2.6 间接ELISA检测方法的建立
2.3 结果与分析
2.3.1 重组质粒pEE12.4-PCV2-Cap的构建
2.3.2 确定嘌呤霉素筛选浓度
2.3.3 CHO-K1细胞瞬转检测
2.3.4单克隆细胞株Western blot检测
2.3.5 发酵过程中活细胞密度以及活力检测
2.3.6 PCV2-Cap单克隆细胞株蛋白表达检测
2.3.7 蛋白纯化
2.3.8 蛋白免疫原性分析
2.3.9最佳抗原包被浓度以及血清稀释度的确定
2.4 讨论
参考文献
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果
致谢
