怀山药微型块茎诱导形成的影响因子研究

摘要

本文以B号山药为材料，研究了不同因子对怀山药微型块茎诱导形成的影响，比较了不同处理中微型块茎生理指标上的差异，并对诱导期内试管苗内源激素含量的变化规律和贮藏期内微型块茎的生理变化规律进行了探讨。结果表明： (1)与一步培养法相比，两步培养法更有利于微型块茎形成； (2)碳源浓度为60g·L时最适宜微型块茎形成，白糖与蔗糖的诱导效果无显著差异，白糖可以代替蔗糖； (3)降低总氮量或提高[NO<,3><'->-N]/[NH<,4><'+>-N]比值有利于微型块茎形成，其中总氮量为 30mmol/L或[NO<,3><'->-N]/[NH<,4><'+>-N]比值为3：1时，诱导效果好； (4)与对照相比，低浓度的赤霉素对微型块茎的形成有促进作用，浓度过高会抑制块茎形成；KT 2mg·L<'-1>时，虽然形成微型块茎的数量较多，但与对照无显著差异，6-BA不利于微型块茎的形成；NAA和2，4-D分别为0.5、0.1mg·L<'-1>时，有利于微型块茎形成，但以2，4-D 0.1mg·L<'-1>诱导效果好，显著提高了微型块茎的有效数量、总重量和块茎指数；B<,9>、PP<,333>、SA和香豆素均有合适的浓度促进微型块茎形成，但浓度过高会抑制块茎形成，其中，以香豆素10 mg·L<'-1>时块茎指数最高，效果最好。所有处理中，以KT 0.5mg·L<'-1>+2，4-D 0.1mg·L<'-1>+PP<,333>0.1mg·L<'-1>诱导效果最好，单株有效微型块茎数达到2.7个； (5)微型块茎的诱导形成因基因型不同表现出一定的差异，与B号山药相比，多数种类中均获得了较好的诱导效果； (6)黑暗2d后光照14h/d时，微型块茎的数量最多，但以黑暗6d后光照4h/d时，最有利于微型块茎形成，微型块茎的各项指标均较高。微型块茎形成过程中，试管苗叶绿素含量的变化有差异，黑暗环境中含量持续下降；黑暗2d后光照14h/d时，含量随着诱导时间的延长先上升后下降； (7)光质对微型块茎形成的影响有赖于植物生长物质的调节：培养基中无激素时，绿光效果最好；添加香豆素或NAA时，白光效果最好；添加KT时，蓝光效果最好； (8)单一内源激素含量的变化因培养基和取材部位的不同而不同，叶片中GA<,3>/ABA比值的变化较为一致，先下降后上升，更能体现块茎的形态建成，比值较低时有利于形成； (9)收获的微型块茎的可溶性糖和可溶性蛋白含量因处理不同表现出一定的差异。贮藏期内，微型块茎的可溶性糖含量逐渐下降，可溶性蛋白含量先上升后下降。本试验建立的怀山药微型块茎诱导体系为其工厂化生产奠定了技术基础。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

1前言

1.1怀山药简介

1.1.1生物学性状及药用价值

1.1.2国内外研究概况

1.2微型贮藏器官离体诱导的研究进展

1.2.1微型贮藏器官离体诱导影响因素的研究进展

1.2.2微型贮藏器官离体诱导中的形态结构及内源激素变化的研究进展

1.3薯蓣属植物微型块茎离体诱导的研究进展

1.4本项研究的内容及意义

2材料和方法

2.1试验材料

2.2试验方法

2.2.1微型块茎诱导形成的影响因子研究

2.2.2微型块茎生理生化指标的测定及试管苗叶绿素含量的测定

2.2.3微型块茎诱导形成中内源激素含量的测定

2.3数据统计及处理

3结果与分析

3.1培养方式对微型块茎诱导形成的影响

3.2碳源对微型块茎诱导形成的影响

3.3氮源对微型块茎形成及微型块茎生理生化变化的影响

3.3.1氮源对微型块茎形成的影响

3.3.2氮源对微型块茎可溶性糖和可溶性蛋白含量的影响

3.4植物生长物质对微型块茎形成及微型块茎生理生化变化的影响

3.4.1赤霉素对微型块茎形成及微型块茎生理生化变化的影响

3.4.2细胞分裂素类对微型块茎形成的影响

3.4.3生长素类对微型块茎形成的影响

3.4.4植物生长延缓剂和抑制剂对微型块茎形成的影响

3.4.5植物生长物质对微型块茎可溶性糖和可溶性蛋白含量的影响

3.4.6 KT与NAA复合处理对微型块茎形成的影响

3.4.7 KT、2，4-D与PP333复合处理对微型块茎形成的影响

3.5基因型对微型块茎诱导形成的影响

3.6光周期对微型块茎形成及微型块茎生理生化变化的影响

3.6.1光周期对微型块茎形成的影响

3.6.2微型块茎诱导形成中试管苗叶绿素含量的变化

3.6.3光周期对微型块茎可溶性糖和可溶性蛋白含量的影响

3.7光质对微型块茎形成的影响

3.7.1不同光质对微型块茎形成的影响

3.7.2香豆素在不同光质中对微型块茎形成的影响

3.7.3 KT在不同光质中对微型块茎形成的影响

3.7.4 NAA在不同光质中对微型块茎形成的影响

3.8微型块茎诱导形成中内源激素含量的变化

3.9微型块茎贮藏过程中的生理生化变化

4讨论

4.1培养方式

4.2碳源

4.3氮源

4.4植物生长物质

4.5光形态建成

4.6赤霉素处理与微型块茎的a-淀粉酶活性

4.7诱导期中试管苗内源激素含量的变化

4.8贮藏期内微型块茎可溶性糖和可溶性蛋白含量的变化

5结论

图版

参考文献

致谢

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