怀地黄脱毒苗离体保存及应用研究

摘要

怀地黄[Rehmannia glutinosa f.hueichingensis(Chan et Sehih)Hsiao]为玄参科地黄属多年生草本植物，其根可入药，具滋阴健肾、消热解毒等功效。由于长期采用营养繁殖，病毒感染严重，导致其产量下降、品质变劣、品种退化。为了解决这一问题，近年来我们建立了怀地黄脱毒快繁及产业化技术体系，在此基础上，进一步对脱毒苗进行离体保存并从形态、生理、产量和品质等方面对其大田表现进行了深入的研究，结果如下： 1.对怀地黄脱毒试管苗进行了缓慢生长保存 常温下，保存脱毒苗的最佳基本培养基和封口材料为MS+封口膜+牛皮纸；有利于脱毒苗在MS+NAA0.0.mg·L-1+6-BA0.2 mg·I-1培养基上保存的几种添加物质及其浓度分别是PP3331mg·L-1、ABA0.5 mg·L-1、蔗糖45～60 g·L-1、甘露醇20 g·L-1、冷凝脂7g·L-1，其中以PP3331mg·L-1的保存效果最好，在此浓度下保存180 d时，存活率为68％。低温下，保存脱毒苗的最佳PP333浓度为2 mg·L-1，最佳甘露醇浓度为30 g·L-1，在此浓度下保存240 d时，存活率分别为67％和64％。 2.对脱毒苗大田生物学性状进行了研究 (1)形态：脱毒苗(脱毒试管苗和脱毒种栽苗，下同)在冠幅、株高、功能叶片长和宽等方面均比非脱毒苗(非脱毒试管苗和对照，下同)有较大优势，表明脱毒苗生长势强。 (2)生理：脱毒苗的叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总含量均高于非脱毒苗，这有利于其维持较强的光合强度，同化更多的光能，积累更多的有机物，为其产量的提高提供一定的物质基础和生理基础；脱毒苗叶片中POD、SOD活力均低于非脱毒苗；脱毒苗叶片中前期可溶性总糖含量高于非脱毒苗，后期低于非脱毒苗，表明脱毒苗生长前期光合能力强，后期具有很强的营养物质及时外运能力；脱毒苗叶片中可溶性蛋白含量在各个时期均较非脱毒苗高，表明脱毒后可以合成更多有机化合物，有利于怀地黄的生长发育；脱毒苗与非脱毒苗净光合速率、蒸腾速率、气孔导度的日变化规律一致，但前者各项指标的值均明显高于后者。 3.对脱毒苗的产量和品质进行了评价 脱毒苗的产量显著高于非脱毒苗，增产最高可达92.51％。脱毒苗块茎中梓醇、可溶性总糖和可溶性蛋白含量均得到不同程度的提高。 由此可见，怀地黄脱除病毒后，在田间表现出了良好的生物学性状，产量大幅度提高，品质得以改善，应在生产中迅速推广应用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

1前言

1.1地黄概述

1.1.1地黄的化学成分和药理作用

1.1.2地黄生产中存在的问题

1.2植物种质资源及其保存的重要性

1.3植物种质资源的离体保存及研究现状

1.3.1组织培养法

1.3.2超低温保存法

1.4地黄种质资源保存研究概况

1.5脱毒苗大田应用及生物学效应研究概况

1.6研究目的及意义

2材料与方法

2.1材料

2.2方法

2.2.1怀地黄脱毒苗离体保存研究

2.2.2怀地黄脱毒苗的快繁、壮苗生根及移栽驯化

2.2.3脱毒苗的生物学性状、块茎产量和品质

2.2.4数据的分析与处理

3结果与分析

3.1怀地黄脱毒苗离体保存研究

3.1.1脱毒苗常温继代保存

3.1.2脱毒苗缓慢生长法保存

3.2怀地黄脱毒苗的快繁、壮苗生根及移栽驯化

3.2.1脱毒苗的快繁

3.2.2脱毒苗的壮苗生根

3.2.3脱毒苗的移栽驯化

3.3脱毒苗的生物学性状、块茎产量和品质

3.3.1脱毒苗的生物学性状

3.3.2产量的测定

3.3.3品质的测定

4讨论

4.1怀地黄脱毒苗离体保存

4.1.1 PP333对怀地黄脱毒苗离体保存的影响

4.1.2 ABA对怀地黄脱毒苗离体保存的影响

4.1.3蔗糖对怀地黄脱毒苗常温保存的影响

4.1.4甘露醇对怀地黄脱毒苗离体保存的影响

4.1.5冷凝脂或琼脂对怀地黄脱毒苗常温保存的影响

4.1.6无机盐和封口材料对怀地黄脱毒苗常温保存的影响

4.2脱毒怀地黄的种性优势

4.2.1脱毒对叶绿素含量的影响

4.2.2脱毒对POD、SOD活力的影响

4.2.3脱毒对可溶性总糖含量的影响

4.2.4脱毒对可溶性蛋白含量的影响

4.2.5脱毒对光合特性的影响

4.2.6脱毒对块茎产量和品质的影响

4.3脱毒怀地黄生产中存在的问题及解决的措施

4.4脱毒怀地黄推广应用的经济、社会及环境效益分析

4.4.1经济效益

4.4.2社会效益

4.4.3环境效益

4.5脱毒怀地黄推广应用前景

5结论

图 版

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表论文