怀菊花超低温保存后再生苗的抗膜脂过氧化能力和遗传稳定性研究

摘要

本研究以怀菊花的优良品种小黄菊[Huaiqingchrysanthemum(Chrysanthemummorifolium)cv.Xiaohuangju]为试材，在前期建立的微滴玻璃化超低温保存技术体系的基础上，对怀菊花超低温保存后再生苗的抗膜脂过氧化能力和遗传稳定性进行了系统研究。研究表明:
　　 1.微滴玻璃化超低温保存增强了再生植株的抗膜脂过氧化能力。
　　 微滴玻璃化超低温保存提高了其低温胁迫的耐受力，增强了再生植株的抗膜脂过氧化能力，再生植株的这种抗膜脂过氧化的优势会在3～8代的继代过程中逐渐减弱。
　　 (1)低温处理过程中，与常温对照植株相比，再生植株叶片萎蔫、冻伤现象延迟，且冻伤明显较轻;叶片中的SOD和POD比活力升高，且在胁迫后期得到加强，同时O2-含量的绝对值降低。
　　 (2)保存后再生植株继代过程中，与常温对照植株相比，再生植株叶片的SOD、APX、CAT和GR酶的比活力在3～5代间均有不同程度的提高，而POD酶的比活力一直无显著差异，MDA、H2O2和O2-的含量在3～5代间均有不同程度的降低;SOD的同工酶条带在3～5代间亮度有明显差异，6～8代间亮度无明显区别，而POD同工酶条带在3～8代间的亮度无明显差异。
　　 2.微滴玻璃化超低温保存后再生植株的遗传稳定性没有发生改变。
　　 (1)再生植株保持了DNA分子水平的稳定。用筛选出的两条引物ISSR02和ISSR07对保存后再生苗及其常温对照苗进行ISSR检测，二者扩增出的19条条带均没有差异。
　　 (2)再生植株保持了大田农艺性状和生理的稳定。与常温对照苗相比，在大田生长过程中，超低温再生植株7～10月份的株高、冠幅、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、叶绿素含量、SOD和POD比活力间均无显著性差异。但超低温再生植株的花期会有所推迟，各个阶段会推迟3～5天不等。
　　 (3)再生植株保持了产量和品质的稳定。对两年两个试验点的产量进行平均分析，发现超低温再生苗的单株花头数和分蘖数要高于其对照，而单株鲜重、单株干重、亩产鲜重和单朵花大小均略低于对照，但二者各个产量指标之间均无显著性差异。花中绿原酸含量也无显著性差异。
　　 (4)再生植株保持了同工酶谱的稳定。与常温对照苗相比，在大田生长过程中，超低温再生植株7～10月份的SOD和POD同工酶谱间无显著性差异。

目录

摘要

缩略语表

1 前言

1．1 植物种质资源超低温保存研究概况

1．2 植物种质资源超低温保存后再生植株的研究进展

1．2．1 超低温保存后再生植株的抗膜脂过氧化能力研究进展

1．2．2 超低温保存后再生植株的遗传稳定性研究进展

1．3 菊花超低温保存及其再生植株的研究概况

1．3．1 菊花超低温保存研究概况

1．3．3 怀菊花简介及其研究进展

1．4 研究内容、目的及意义

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．2 方法

2．2．1 怀菊花RPDC的抗膜脂过氧化能力研究

2．2．2 怀菊花RPDC的遗传稳定性研究

2．2．3 试验数据的统计及处理

3 结果分析

3．1 怀菊花RPDC的抗膜脂过氧化能力分析

3．1．1 低温胁迫对怀菊花RPDC抗膜脂过氧化能力的影响

3．1．2 继代培养对怀菊花RPDC抗膜脂过氧化能力的影响

3．2 怀菊花RPDC的遗传稳定性分析

3．2．1 怀菊花RPDC的遗传稳定性分析

3．2．2 怀菊花RPDC大田生长发育过程中的遗传稳定性分析

4 讨论

4．1 超低温保存后再生植株的抗膜脂过氧化能力

4．1．1 超低温保存后再生植株的低温抗性

4．1．2 继代培养对再生植株抗膜脂过氧化能力的影响

4．1．3 继代培养对再生植株的SOD和POD同工酶谱的影响

4．2 超低温保存后再生植株的遗传稳定性

4．2．1 超低温保存后再生植株遗传稳定性的分子检测

4．2．2 超低温保存后再生植株大田农艺性状的遗传稳定性

4．2．3 超低温保存后再生植株大田生长过程生理特性的遗传稳定性

4．2．4 超低温保存后再生植株产量和品质的遗传稳定性

5 结论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表论文

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