鸡传染性法式囊病毒VP3蛋白B细胞抗原表位的研究

摘要

鸡传染性法氏囊病(InfectiousBursaLDisease，IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的鸡的一种高度接触性传染病。病毒在法氏囊的B淋巴细胞中迅速繁殖，损伤法氏囊的B淋巴细胞，引起严重的免疫抑制，对养鸡业造成严重的经济损失。IBDV属于双RNA病毒科的成员，病毒基因组由A，B两个片段的双股RNA组成，其中，结构蛋白VP3是由基因组A片段编码的。 B细胞抗原表位又称抗原决定簇，是抗原分子上能够被抗体分子识别的部位，在蛋白质抗原中一般由几个直接相邻或构象上相邻的氨基酸组成，决定着机体产生抗体的特异性，是诱导体液免疫的基本单位。对以体液免疫反应为主的IBDV来说，鉴定其B细胞抗原表位便是揭示IBD体液免疫的本质。 本项研究应用基因工程技术构建了VP3基因原核表达载体pETVP3，并在大肠杆菌中诱导表达了鸡IBDV主要结构蛋白VP3。表达蛋白能够与鸡IBDV抗血清发生特异性反应，应用该表达蛋白初步鉴定了VP3B细胞抗原表位。 在应用生物信息学原理分析鸡IBDVVP3蛋白结构特性的基础上，合成了VP320-mer重叠多肽28条，VP312-mer重叠多肽30条，合成多肽与载体蛋白BSA偶联后，经peptide-ELISA和Dot-ELISA检测其与鸡IBDV多抗的反应性。结果显示，VP3中含有6个EP6:728PRDWDRLPYLNL739;ES7:818LANAPQAGSKSQRA831;ES8:851QREKDTRISKKMETMGIYFATP872,ES9:876ALNGHRGPSPGQLKYWQNTRE1897;ES10:961QMKDLLLTAMEMK973;EP7:982PKPKPKPNAPTQ993多抗反应位点 通过本项研究，绘制了鸡IBDVVP3蛋白的抗原表位图谱，对揭示IBDV体液免疫产生的本质具有重要意义，同时为设计IBDV新型表位疫苗及研制IBDV特异性检测试剂奠定了基础。

目录

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致谢

论文说明：氨基酸及保护基团代码表、缩略词表

摘要

文献综述

引言

第一部分鸡传染性法氏囊病病毒VP3蛋白的克隆表达及其B细胞抗原表位的初步鉴定

第二部分应用重叠多肽扫描技术鉴定鸡传染性法氏囊病毒结构蛋白VP3 B细胞抗原表位

结论

参考文献