猪精液常温保存稀释液配方的筛选及精子顶体染色研究

摘要

人工授精技术可以提高养猪经济效益,推广优秀种公猪的精液,加速品种改良的进程。猪精液保存的水平,是提高人工授精技术的首要环节,极大地提高公猪精液使用的时间性和地域性。猪精液常温保存技术在人工授精中已广泛应用。在提高种公猪的利用效率,推动猪人工授精技术的发展具有重大意义。为了有效开展猪人工授精技术推广,猪精液的稀释保存是关键技术。
　　 本研究采用两种剂型,设计了10种猪精液常温保存稀释液配方,通过对精液保存后精子活力的检测试验结果表明:粉Ⅰ、粉Ⅱ/Ⅰ、Ⅰ与Ⅱ的精子活率、总存活时间均极显著高于(p<0.01)Ⅲ、Ⅳ、粉Ⅲ、粉Ⅳ,且均显著高于(p<0.05)Ⅴ、粉Ⅴ,而Ⅴ、粉Ⅴ均显著高于(p<0.05)Ⅲ、Ⅳ、粉Ⅲ、粉Ⅳ,虽然粉Ⅰ、粉Ⅱ的这3项指标均略高于Ⅰ、Ⅱ,但差异不显著(p>0.05)。取得了较为理想的保存效果,筛选出了Ⅰ、Ⅱ、粉Ⅰ、粉Ⅱ四种稀释液为最佳配方；精液在该配方中保存了3天和4.5～5天,其活率分别为0.5和0.3。
　　 为了有效验证最佳稀释液的保存效果,确保稀释保存后,精液具有较高的受精能力,采用苯胺蓝—龙胆紫顶体染色法对常温保存的猪精子进行了染色,其顶体完整率在精液稀释后72h和120h时,分别为95％和70％以上；并研究了温度与pH值对精液常温保存效果的影响,结果表明:最佳常温保存温度为1512～20℃；最佳pH值为6.5～6.9。
　　 为了检验稀释液配方的应用效果,分别应用粉Ⅰ、粉Ⅱ、Ⅰ与Ⅱ配方对精液进行稀释,并对母猪进行人工授精试验,结果表明:粉Ⅰ、粉Ⅱ、Ⅰ与Ⅱ号配方稀释保存精液的受胎率与平均窝产仔数均显著高于(p<0.05)自然交配的受胎率与平均窝产仔数,说明粉Ⅰ、粉Ⅱ、Ⅰ与Ⅱ号配方稀释保存的精液,进行人工授精取得了理想的授精效果。且粉剂稀释液粉Ⅰ、粉Ⅱ,不但保存效果好,而且其稳定性强,运输携带方便,制作工艺简单,作为一种产品式的猪精液稀释保存液,更适宜在养猪生产中推广应用。本研究为常温保存稀释液在养猪生产实践中推广应用提供了参考依据。
　　 本研究所开发的精液稀释液的粉剂,经稀释后,扩大了精液的容量,延长了精液的有效保存时间,与自然交配相比,提高了母猪受胎率和产仔数。在规模化猪场应用后,可显著提高养猪的经济效益。

目录

文摘

英文文摘

致谢

1.文献综述

1.1 猪精液保存技术的研究进展保

1.2 常温保存

1.3 低温保存

1.4 冷冻保存

1.5 精液保存方法比较

1.6 猪精液常温保存的意义

1.7 猪精液常温保存的前景

2.引言

3.材料与方法

3.1 试验公猪及精液

3.2 主要生化药品

3.3 仪器及用品

3.4 猪精液常温保存稀释液配方

3.5 试验方法与步骤

3.6 试验数据处理

4.结果与分析

4.1 不同常温稀释液配方保存后的精液保存效果

4.2 猪精液常温保存的最佳温度

4.3 猪精液常温保存的最佳PH值

4.4 四种最佳配方保存后精子顶体染色结果

4.5 两种稀释配方稀释保存猪精液的人工授精结果

5.讨论

5.1 不同保存温度对精液保存的影响

5.2 不同PH值对精液保存的影响

5.3 不同稀释液配方对精液保存效果的影响

5.4 顶体染色的意义

5.5 不同剂型稀释液在推广应用中比较

6.结论

参考文献