养心颗粒对近似不稳定型心绞痛模型颈总动脉PDGF-B mRNA和VEGF mRNA影响的研究

摘要

目的：通过观察以益气养心安神为立法组成的中药复方养心颗粒对近似不稳定型心绞痛家兔模型颈总动脉血小板源生长因子-BmRNA及血管内皮生长因子mRNA表达的影响,从分子生物学水平探讨其可能的作用机制,为临床应用提供理论依据。 方法：以球囊一次性损伤家兔颈动脉结合高脂饮食喂养,8周末后随机分为模型对照组、养心颗粒组,消心痛组和阿托伐他汀组,每组各7只,另取7只家兔为空白对照组,于10周末进行药物触发的方法复制成近似不稳定型心绞痛动物模型。运用体表彩色超声方法观察各组家兔颈总动脉内中膜厚度及血流变化情况；采用HE染色观察模型血管病理形态学变化；采用电镜观察超微结构变化；采用酶标法观察模型血脂成分含量变化；采用速率散射光比浊法测定血浆纤维蛋白原的水平；采用放免法检测血浆内皮素和一氧化氮含量的变化；采用RT-PCR法观察颈总动脉血小板源生长因子-BmRNA和血管内皮生长因子mRNA表达的变化。 结果： 1.根据体表超声测定,与空白对照组相比,各组在8周末时,均出现颈总动脉IMT明显增厚(P<0.01),PI及RI显著增加(P<0.05),而VS加快不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。10周末时,模型对照组IMT、PI、RI值继续增加,养心颗粒治疗组和消心痛治疗组的IMT、PI、RI值明显下降,与模型对照组相比,差异有统计学意义(P<0.0 5),但不如阿托伐他汀组。 2.病理研究结果表明,除空白对照组外,各组均出现血管内皮损伤,血管内膜增厚,脂肪沉积明显,脂质斑块形成。各治疗组颈总动脉内皮细胞轻度减少,内膜轻度增厚,内膜下脂质沉积减少。 3.在第8周末时,除空白对照组外,各组TC、TG、LDL-C明显升高,HDL-C明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);第10周末时,模型对照组TG继续升高,与8周相比,差异有统计学意义(P<0.01),TC、HDL-C、LDL-C均无明显变化(P>0.05);养心颗粒组中的TG含量与8周末相比,无显著变化(P>0.05),CHO和LDL-C明显降低,与8周末相比,差异有统计学意义(P<0.05);阿托伐他汀组中TC、TG和LDL-C含量均有所降低,HDL-C升高,与8周末相比,差异有统计学意义(P<0.05);消心痛治疗组各项指标均无明显影响(P>0.05)。 4.与空白对照组相比,各组在8周末Fbg的含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);10周末,与模型对照组相比,各治疗组Fbg含量均有所降低,差异有统计学意义(P<0.01);各治疗组间比较,养心颗粒疗效优于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05)。 5.与空白对照组相比,8周末各组血浆NO含量均显著降低,而血浆ET含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);10周末,与模型对照组比较,各治疗组血浆NO含量均有显著升高,血浆ET含量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);各治疗组间相比较,消心痛组疗效优于另外两组,差异有统计学意义(P<0.01),而养心颗粒与阿托伐他汀组相比,差异无统计学意义。 6.与模型对照组相比,各治疗组均可下调PDGF-B mRNA表达(P<0.01),养心颗粒治疗组的PDGF-B mRNA表达显著低于消心痛和阿托伐他汀治疗组(P<0.05);同时各治疗组均可上调VEGF mRNA的表达(P<0.01),养心颗粒治疗组的PDGF-B mRNA表达显著高于另外两组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论：以益气养心安神法组成的中药复方制剂养心颗粒对近似不稳定型心绞痛模型具有明确的防治作用,它可以下调PDGF-BmRNA表达,上调VEGFmRNA表达,其可能是通过调整人体阴阳平衡、改善血管内皮系统功能障碍、抑制血管内膜增生,从而改善模型血管的病理形态学的异常,减轻血管内膜增厚程度和斑块易损程度,起到防治不稳定型心绞痛的作用。

目录

论文说明：缩略语表

声明

前言

文献综述

一.祖国医学对冠心病不稳定型心绞痛的认识及研究进展

(一)对病因的认识及研究进展

(二)对病机的认识及研究进展

(三)各种证型的现代研究进展

(四)中医药对本病的治疗进展

二.现代医学对UA的认识及研究进展

(一)流行病学

(二)危险分层

(三)关于发病机制

(四)易损斑块标志物与UA

(五)血小板源生长因子、血管内皮生长因子与UA的关系

(六)现代医学对UA的防治进展

材料与方法

一.实验动物

二.实验药物

三.主要实验仪器

四.主要实验试剂

五.模型制备

六.分组及给药方法

七.取材

(一)病理组织

(二)采血

八、观察指标及方法

(一)颈动脉体表超声检查

(二)光镜观察模型颈总动脉病理形态学变化

(三)电镜观察各组兔颈总动脉血管超微结构变化

(四)模型血脂的测定

(五)模型血清ET、NO的测定

(六)模型血浆纤维蛋白原的测定

(七)模型颈总动脉PDGF-B mRNA、VEGF mRNA表达的检测

(八)统计学处理

结果

一.各组家兔治疗前后IMT、Vs、PI、RI测值的比较

二.病理形态学变化

三.超微结构变化

四.各组家兔血脂成分的含量变化情况

五.各组家兔血浆ET、NO的含量变化情况

六.各组家兔血浆Fbg的含量变化情况

七.各组家兔治疗后PDGF-B mRNA和VEGF mRNA的表达情况

(一)颈总动脉PDGF-B mRNA及VE6F mRNA的RT-PCR结果

(二)颈总动脉PDGF-B mRNA、VEGF mRNA电泳产物灰度扫描值变化

讨论

一.关于动物模型

二.关于不稳定性心绞痛的病因病机及治法

三.关于养心颗粒的组方分析

四.关于养心颗粒对模型病理形态学及超微结构变化

五.关于养心颗粒对模型IMT的影响

六.关于养心颗粒对模型血浆纤维蛋白原含量的影响

七.关于养心颗粒对模型血脂含量的影响

八.关于养心颗粒对模型血浆内皮素和一氧化氮含量的影响

九.关于养心颗粒对模型PDGF-B mRNA表达的影响

十.关于养心颗粒对模型VEGF mRNA表达的影响

十一.展望

结论

参考文献

致谢

个人简历

附图