不同佐剂对鸡新城疫病毒(LaSota株)和禽流感病毒(X-19株)联合免疫的影响

摘要

禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)和新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)可以感染多种家禽及鸟类，给我国乃至世界养禽业的发展造成了严重的经济损失。其中H9亚型禽流感是危害我国养禽业的主要AIV亚型，且易与NDV发生混合感染，不仅造成经济损失，而且会给防疫工作带来困难，因此，进行禽流感与新城疫病毒的联合免疫，可以在防止混合感染的同时提高免疫效率，减少鸡群因AIV、NDV感染而造成的损失。
　　本研究在优化生产工艺的基础上，运用两种新型佐剂（ISA71VG和ISA71RVG）和白油制备了3种鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联免疫制剂，对3种免疫制剂的物理性状、安全性、免疫效果、免疫期等进行比较研究，为选择最优佐剂，研制商品化的鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗奠定基础。本研究主要包括以下几个方面：
　　1.采用新城疫病毒La Sota株、H9亚型禽流感病毒X-19株分别接种9日龄SPF鸡胚，得到病毒含量分别是108.5EID50/0.1mL和107.5EID50/0.1mL的两种病毒液。两病毒液均使用甲醛溶液灭活后，采用超滤膜浓缩3-4倍，两种病毒液血凝价均达到1:1024。使用不同佐剂分别制备了3种新城疫、禽流感二联免疫制剂，对所研制免疫制剂的质量进行了初步评价，其物理性状及安全性检验均符合相应规定。
　　2.每种免疫制剂分别通过胸部肌肉注射1周龄SPF鸡30只，每只注射0.6mL，持续观察8周，全部存活，未出现因疫苗引起的局部和全身不良反应，定期眼观和镜检不同佐剂在局部的吸收情况及局部组织学病理变化，每组免疫鸡注射部位在疫苗免疫后均出现局部病变和不吸收现象，恢复较快的是ISA71VG组和ISA71RVG组，杭州白油组吸收稍差。
　　3.每种免疫制剂分别通过胸部肌肉注射免疫1周龄SPF鸡30只，接种后定期采血，分离血清，检测不同佐剂组鸡抗新城疫病毒和抗禽流感病毒(H9)HI抗体的变化规律。试验鸡用新城疫强毒北京株F48E9肌肉注射攻毒，观察14日，免疫组鸡100％保护，对照组全部死亡；用禽流感X-19株病毒液静脉注射攻毒，观察5日，免疫组鸡病毒分离100%阴性，对照组鸡病毒分离阳性率为80%。结果表明，对照鸡血清抗体检测为阴性，免疫21天后，免疫组鸡的新城疫、禽流感H9亚型抗体效价均高于1:64，免后20周，抗体仍处于保护水平。其中ISA71VG组在免后5d即可产生抗体，该免疫制剂诱导产生的特异性抗体速度快，抗体达到理想水平所需的时间较短，产生的抗体持续期较长。
　　4.采用可特异性检测CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的荧光标记单抗，分别对免疫组和对照组鸡的外周血T淋巴细胞及其亚群进行监测。结果表明，试验鸡的外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞百分含量在7日龄时最低。7日龄免疫后，免疫组较对照组相比，CD4+、CD8+T淋巴细胞水平均有所提高，其中ISA71VG免疫组的外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞均显著高于对照组，表明该免疫制剂在一定程度上可以激发体液免疫和细胞免疫。

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缩略词表

文献综述

1.禽流感、新城疫病原学概述

2.禽流感、新城疫流行病学

3禽流感、新城疫疫苗与佐剂研究进展

4.新流联合免疫研究现状

5.结语

引言

试验一 不同佐剂制备鸡新城疫、禽流感(H9 亚型)二联免疫制剂及其安全性研究

1.材料和方法

2结果与分析

3 结论与讨论

实验二 鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗免疫效力试验

1 材料与方法

2结果与分析

3结论与讨论

全文总结

参考文献

英文摘要