H2O2参与的细菌间体在细胞分裂中的功能及其分子机制研究

摘要

本实验拟以大肠杆菌及其多个H2O2相关基因的突变体资源为材料，利用可见、紫外分光光度法，透射电子显微镜等技术，研究 H2O2对细菌间体功能的介导及其分子机制，探讨细胞分裂中 H2O2参与的间体的功能；阐明 H2O2额外大量产生及时空定位转换的问题，分析这些额外产生的 H2O2的胞内来源。该项目的完成将进一步阐明和完善 H2O2的作用机理和生物学功能。对细菌特有细胞器-间体功能完成机制的阐释，将有助于细菌功能学研究的进一步深入。
　　实验结果表明：在常规组织化学方法基础上调整和改进了电镜组织化学染色法，确定了 H2O2的染色与样品固定同时进行是定位细菌细胞中内源性 H2O2的一种可取方法。观察了大肠杆菌 H2O2在细胞分裂周期中的时空定位变化。基因突变和外源加入 CAT处理都会影响胞内 H2O2的水平，H2O2含量与大肠杆菌的生长繁殖呈负相关。离体后间体中仍有大量 H2O2产生和积累，确定间体是额外 H2O2的胞外产生来源。加入盐酸羟胺后立即在4℃条件下冰浴处理10min，之后在40℃条件下温浴40min，为间体重新释放 H2O2的最佳条件。间体对原生质体再生起到积极作用。结论：在大肠杆菌菌株中发现胞内额外的大量 H2O2积累和定位与细胞分裂的进程密切相关，这种 H2O2的时空变化很可能是细菌分裂时的普遍现象。且H2O2对细菌增殖中具有重要的作用。

目录

第1章 绪 论

1.1大肠杆菌概述

1.2细菌间体功能及结构

1.3细菌内源H2O2

第2章 大肠杆菌内源H2O2的时空定位分析

2.1引言

2.2试验材料

2.3试验方法

2.4结果与分析

2.5讨论

第3章 大肠杆菌生长过程中H2O2对生长繁殖的影响

3.1引言

3.2试验材料

3.3试验方法

3.4结果与分析

3.5讨论

第4章 H2O2介导的间体功能分析

4.1引言

4.2试验材料

4.3试验方法

4.4结果与分析

4.5讨论

第5章 结 论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间的研究成果