葡萄抗炭疽病QTL定位及分析

摘要

葡萄在我国果树生产中占有重要地位，葡萄炭疽病是由胶胞炭疽菌引起的危害葡萄生产的主要病害之一，严重影响葡萄产量和品质。利用丰富的葡萄资源，培育新的抗性优良品种，是解决和防治葡萄炭疽病的根本途径。传统育种方法表现出育种效率较低、育种周期较长等缺点，为育种工作带来不便，因此利用分子标记技术构建出分子遗传图谱，对抗病性相关 QTL检测分析，筛选葡萄资源中的抗性标记或者基因，能在很大程度上缩短育种的周期，加速抗性育种的进程。本研究以欧亚种葡萄‘里扎马特’为母本，中国野生刺葡萄‘黑珍珠’为父本进行杂交，以随机选择的92株杂交后代为研究群体。通过探讨葡萄炭疽病的抗性鉴定方法，对杂交后代的抗性单株进行有效选择；借助 SRAP和 SSR分子标记技术构建葡萄遗传图谱，采用区间作图法，对葡萄炭疽病抗性相关 QTL检测并分析。本研究为深入分析葡萄炭疽病的遗传规律奠定了基础，为葡萄抗炭疽病分子育种的发展提供了理论依据。主要研究结果如下：
　　1.分别采用菌液接种法和菌饼接种法鉴定葡萄离体叶片的抗性；果实的抗性鉴定，采用菌液接种法和涂抹接种法；使用70％乙醇或丙酮分别作为浸提剂对果实进行浸提，获得浸提液，对其进行抗性鉴定。结果显示，菌液接种法更适用于葡萄叶片和果实的抗性鉴定；70%乙醇或丙酮均可作为浸提剂提取果实浸提液用于果实浸提液的抗性鉴定。抗性鉴定结果表明，葡萄炭疽病抗性表现为多基因共同作用的数量性状遗传。
　　2.利用作图软件Joinmap4.0构建出一张葡萄分子遗传图谱，本图谱共含有85个SSR标记和24个SRAP多态性标记位点，形成17个连锁群，第4号、第17号连锁群缺失。图谱覆盖了葡萄基因组总长度977.7cM，图谱内连锁群的平均长度为57.5cM，标记之间的平均间距为7.76 cM。
　　3.本研究在第12号连锁群上检测到一个与葡萄抗炭疽病相关的 QTL，其可解释的表型变异达37.07%，贡献率达到71.50%，因此认为此 QTL是抗葡萄炭疽病的一个主效QTL。此QTL区间内LOD值最高处所对应的位点位于17.06 cM处，与 SSR标记 VMC8G9之间的距离为2.14cM，与 SRAP标记 M1E12-1500-m之间的距离为0.96 cM。

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第1章 综述

1.1 葡萄炭疽病研究进展

1.2 遗传图谱

1.3 QTL定位

1.4 研究目的、意义及技术路线

第2章 葡萄杂交后代炭疽病抗性鉴定

2.1 引言

2.2 材料与方法

2.3 结果与分析

2.4 讨论

第3章 葡萄分子遗传连锁图谱的构建

3.1 引言

3.2 试验材料、试剂与试验方法

3.3 结果与分析

3.4 讨论

第4章 葡萄抗炭疽病QTL定位

4.1 引言

4.2 材料与方法

4.3 抗葡萄炭疽病QTL定位分析

4.4 讨论

第5章 结论

5.1 结论

5.2 创新点及展望

参考文献

缩略语词汇表

致谢

攻读学位期间的研究成果