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一株角蛋白降解菌的筛选、鉴定及最佳发酵条件的优化

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第一章 文献综述

1.1 角蛋白及其应用价值

1.2 微生物源角蛋白酶

1.2.1 细菌

1.2.2 放线菌

1.2.3 真菌

1.3 微生物源角蛋白酶的理化性质

1.4 微生物源角蛋白酶的酶解作用机理

1.5 微生物源角蛋白酶的应用研究

1.5.1 生物医药

1.5.2 畜禽养殖

1.5.3 生态农业

1.5.4 其他

1.6 角蛋白酶研发存在的问题

1.7 本研究的目的意义及主要内容

1.7.1 本研究的目的意义

1.7.2 本论文研究的主要内容

第2章 一株角蛋白降解菌的筛选及鉴定

2.1 材料与方法

2.1.1 材料

1.样品采集

2.羽毛及羽毛粉

3.主要化学试剂

本研究所用的主要化学试剂见表2-1。

4.培养基的配制

5.主要仪器

本研究所用的主要仪器见表2-2。

2.1.2 方法

1.样品采集及增菌培养

2.羽毛角蛋白降解菌的初筛

3.羽毛角蛋白降解菌的复筛

4.高酶活羽毛角蛋白降解菌的经典试验鉴定

5.高酶活羽毛降解菌的分子生物学鉴定

6.羽毛降解菌株的鉴定

2.2 结果与分析

2.2.1 羽毛角蛋白降解菌的初筛

2.2.2 羽毛角蛋白降解菌的复筛

2.2.3 高酶活羽毛角蛋白降解菌Lcka的经典试验鉴定

1.培养特性观察

2.染色特性观察

3.角蛋白降解菌的生理生化特性分析

2.2.4 高酶活羽毛降解菌Lcka的分子生物学鉴定

1.16S rDNA PCR扩增

用细菌基因组DNA快速提取试剂盒提取产酶菌株中总DNA后16S rDNA PCR扩增电泳结果如图3-

2.高酶活羽毛降解菌Lcka菌株系统发育树构建

由图2-5可知,菌株Lcka与短短芽孢杆菌在同一进化树分支上,由此可初步判定该菌株为短短芽孢杆菌。

2.2.5 菌种的鉴定

2.3 讨论

第3章 一株羽毛角蛋白降解菌最佳发酵条件的优化

3.1 材料与方法

3.1.1 材料

1.样品采集

2.羽毛及羽毛粉

3.主要化学试剂

本研究所用的主要化学试剂同第2章。

4.培养基的配制

5.主要仪器

本研究所用的主要仪器同第2章。

3.1.2 方法

1.种子液的制备

2.液体发酵及粗酶液制备

3.羽毛角蛋白酶酶活测定

4.羽毛角蛋白降解率的测定

5.羽毛角蛋白最佳降解条件的优化

3.2 结果与分析

3.2.1 培养基初始pH值对羽毛角蛋白降解的影响

3.2.2 不同培养温度对羽毛角蛋白降解的影响

3.2.3 不同接种量对羽毛角蛋白降解的影响

3.2.4 不同种龄对羽毛角蛋白降解的影响

3.2.5 不同发酵时间对羽毛角蛋白降解的影响

3.2.6 最佳发酵条件

综上所述,高酶活羽毛降解菌Lcka对羽毛角蛋白降解最佳发酵条件分别为PH7,温度为37℃,接种量为3

3.2.7 最佳发酵条件对羽毛角蛋白降解效果的测定

3.3 讨论

第4章结论

参考文献

致 谢

攻读学位期间的研究成果

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