燧心胶囊干预慢性心力衰竭大鼠心室重塑的机制研究

摘要

目的：以慢性心力衰竭大鼠为研究对象，观察燧心胶囊对血流动力学及心室重塑的影响，测定大鼠血清中AngⅡ、ALD、BNP含量，检测心肌细胞凋亡率并测定心肌组织Bax、Bcl-2mRNA水平及其蛋白表达，以探究燧心胶囊干预心室重塑的作用机制，为临床进一步应用奠定工作基础。 方法：运用随机数字表法将60只大鼠分为假手术组、模型对照组、地高辛组、卡托普利组、燧心胶囊低剂量组、燧心胶囊高剂量组。采用腹主动脉缩窄术建立大鼠慢性心力衰竭模型，连续给药12周后，以Medlab6系统检测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力最大变化速率(±dp/dtmax)以及心率(HR);处死大鼠，称取全心质量(HW)、左室质量(LVW)，计算心脏重量指数(HWI)和左室质量指数(LVMI);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清AngⅡ、ALD、BNP浓度;HE染色观察心肌组织病理学改变;TUNEL法测定心肌细胞凋亡率;Real time PCR检测心肌细胞凋亡基因Bcl-2mRNA、Bax mRNA水平;免疫组化法观察大鼠心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。 结果：1、收缩功能检测:与模型对照组比较，地高辛组、卡托普利组、燧心胶囊低剂量组、燧心胶囊高剂量组大鼠LVSP、+dp/dtmax均有显著性升高(P＜0.01)。其中燧心胶囊高剂量组+dp/dtmax升高较低剂量组显著，两者比较差异具有统计学意义(P＜0.05);舒张功能检测:与模型对照组比较，卡托普利组和燧心胶囊高剂量组LVEDP显著性下降(P＜0.01)，-dp/dtmax显著性升高(P＜0.05)。而地高辛组和燧心胶囊低剂量组LVEDP显著性下降(P＜0.05)，-dp/dtmax则无明显改变(P＞0.05)。2、HWI、LVWI测定:与模型对照组比较，卡托普利组、燧心胶囊高剂量组大鼠HWI、LVWI显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.01)，地高辛组、燧心胶囊低剂量组HWI、LVWI无显著性变化(P＞0.05)。而燧心胶囊低剂量与高剂量两组比较差异具有统计学意义(P＜0.01)。3、血清AngⅡ、ALD、BNP检测:与模型对照组比较，地高辛组、卡托普利组、燧心胶囊低剂量组、燧心胶囊高剂量组大鼠血清AngⅡ、ALD、BNP浓度均显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。燧心胶囊高剂量组BNP浓度较低剂量组降低显著，两者比较具有统计学意义(P＜0.05)。4、心肌组织病理学变化:模型对照组部分心肌萎缩，心肌间隙增宽，部分心肌纤维断裂。而卡托普利组与燧心胶囊高剂量组心肌细胞及纤维萎缩程度较轻，部分核尚存。5、TUNEL法测心肌细胞凋亡率:与模型对照组比较，地高辛组、卡托普利组、燧心胶囊低剂量组和高剂量组心肌细胞凋亡率均有显著性下降（P＜0.05或P＜0.01），其中燧心胶囊高剂量组下降较低剂量组显著，两组比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。6、大鼠心肌细胞凋亡基因Bcl-2和Bax mRNA及其蛋白表达的变化:与模型对照组比较，卡托普利组、燧心胶囊低、高剂量组大鼠Bcl-2mRNA水平及其蛋白表达增高，Bax mRNA水平及其蛋白表达降低，差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。其中燧心胶囊高剂量组对Bcl-2和Bax mRNA及其蛋白的调控程度较低剂量组显著，两者比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。Bcl-2/Bax结果显示:与模型对照组比较，卡托普利组、燧心胶囊低、高剂量组大鼠Bcl-2/Bax显著性增高(P＜0.01)，其中燧心胶囊高剂量组升高程度较低剂量组显著，两组比较差异具有统计学意义(P＜0.01)。 结论：1、燧心胶囊可加强慢性心力衰竭大鼠心肌收缩力、提高左心室内压力上升的最大速率，降低左心室舒张末期压、升高等容舒张期心室压力下降的最大速率，从而改善慢性心衰大鼠心室收缩和舒张功能，纠正其异常的血流动力学状态，其疗效有剂量依赖关系。2、燧心胶囊能够延缓或逆转左室重塑的形成，其疗效有剂量依赖关系。3、燧心胶囊治疗可有效降低循环中AngⅡ、ALD和BNP水平，从而抑制慢性心力衰竭时神经激素的过度激活，干预心室重塑的过程。4、高剂量燧心胶囊能够调控凋亡基因Bcl-2和Bax mRNA水平及其蛋白表达，抑制心肌细胞程序性死亡，使衰竭心脏由失代偿状态向代偿状态转化，延缓心力衰竭的进程。

目录

摘要

英文缩略语表

引言

文献综述

材料与方法

一、燧心胶囊的制备

二、实验材料

三、实验方法

(一)大鼠慢性心力衰竭模型的复制

(二)实验动物分组及给药方法

(三)标本采集方法

(四)实验流程

(五)实验指标检测

(六)数据处理和统计学分析

结果

一、燧心胶囊对慢性心衰大鼠左室压力的影响

二、燧心胶囊对慢性心衰大鼠重量指数、左室质量指数的影响

三、燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠AngⅡ、ALD、BNP的影响

四、燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

讨论

一、心力衰竭中医病机探析及燧心胶囊组方研究

二、慢性心衰大鼠模型的复制

三、燧心胶囊对慢性心衰大鼠血流动力学的影响

四、燧心胶囊干预慢性心衰大鼠左室重塑的作用

五、燧心胶囊对慢性心衰大鼠RAAS系统的影响

六、燧心胶囊对慢性心衰大鼠脑钠肽(BNP)的影响

七、燧心胶囊对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响

八、展望

结论

致谢

参考文献

攻读博士学位期间发表的论文

声明

个人简历