通天草提取物对AD大鼠NF-kB信号通路相关蛋白表达影响的实验研究

摘要

目的：本课题以"神经免疫炎症假说"和"β-淀粉样蛋白级联假说"为理论基础,利用"HE染色"和"IHC"检测痴呆(AD)大鼠海马区神经元形态结构以及NF-KB、IKB-α蛋白表达的变化,从细胞、分子水平确定通天草提取物对Aβ1-40所致AD大鼠的作用效果并初步探讨其作用机制. 方法：本课题依据"β淀粉样蛋白级联假说",使用脑立体定位仪确定大鼠单侧海马Cal区的颅骨投影位置,注射定量Aβ1-40聚合片段,从而复制得到痴呆(AD)动物模型.通过HE染色法观察注射半球大鼠海马区细胞病理形态学变化,并利用IHC检测AD大鼠脑内NF-KB、IKB-α和caspase-3蛋白含量的变化,初步确定通天草提取物对AD大鼠的作用效果,为进一步的机制研究提供依据. 结果：模型组AD大鼠海马区结构异常,细胞带紊乱、并呈散在分布,神经元缺失明显,胞体缩小,核固缩,胶质细胞增生;NF-KB蛋白表达升高、IKB-α蛋白表达降低、caspase-3蛋白表达升高与正常组比较具有明显差异.2.西药组与模型组相比AD大鼠海马区细胞结构排列相对整齐,神经元形态基本常,分布均匀;NF-κB蛋白表达降低、IKB-α蛋白表达升高、caspase-3蛋白表达降低,差异具有显著性.3.给药组与模型组相比AD大鼠海马区细胞结构发生不同程度的改善;NF-κB、IKB-α、caspase-3蛋白表达也具有相同趋势的改变,其变化趋势为：醇高组＞水高组＞醇低组＞水低组 结论：1.通天草提取物能够通过提高AD大鼠海马区内IKB-α的含量,减少NF-κB与IKB-α裂解,避免NF-κB进入细胞核行使其转录激活功能抑制caspase-3被激活,避免细胞凋亡的发生,保护神经元的正常形态和功能.2.通过分析实验数据可知,通天草醇提高剂量组的作用效果优于等临床剂量的通天草水提高剂量组,因此推测通天草改善老年痴呆(AD)病理变化的有效成分主要存在于80%乙醇提取物中.

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