中药白芷对酪氨酸酶活性功效关联性研究

摘要

白芷为伞形科植物白芷Angelica dahurica( Fisch.ex Hoffm.) Benth. et Hook.f.或杭白芷A.dahurica( Fisch.ex Hoffm.) Benth.et Hook.f.var.Formvsana( Boiss) Shan et Yuan的干燥根，主要含香豆素类及挥发油类成分。白芷的不同提取部位，对黑色素合成的限速酶酪氨酸酶有抑制或激活作用，临床上可分别用于美白和治疗白癜风。本论文采用谱效关系、成分敲出、血清药理学的物质基础研究方法，对白芷中酪氨酸酶活性功效关联成分进行探索，筛选出对酪氨酸酶有激活或抑制作用的化合物。本论文包括以下内容：
　　第一章、中药物质基础研究综述
　　中药物质基础研究是中药现代化进程的重要环节之一。随着现代医药科学技术的进步，中药物质基础的研究方法从传统的借鉴天然药物化学的化学分离、活性导向分离，向越来越贴近中药成分复杂、协同药效特点的方向发展，计算机、化学、生物学、中医学等多学科、多技术、多方式的交叉融汇，中药物质基础的研究层层深入。本章就中药物质基础研究的思路和方法进行归纳总结，以期能为中药药效物质基础的研究提供借鉴。
　　第二章、基于谱效关系的白芷酪氨酸酶活性成分研究
　　运用HPLC法测定不同加热条件处理的白芷药材水提液的特征图谱，并通过体外酪氨酸酶活性测定法分别测定上述各白芷水提液对酪氨酸酶活性的影响，运用偏最小二乘法进行数据分析，研究白芷量化特征图谱色谱峰和酪氨酸酶活性的相关性，筛选出S6、S14、S18、S21、S35、S36、S37、S40、S41峰与白芷水提液酪氨酸酶抑制活性呈正相关且相关系数较大；S8、S9、S11、S12、S22、S30峰与白芷水提液酪氨酸酶抑制活性呈负相关，且相关系数的绝对值较大。
　　第三章、基于成分敲出的白芷酪氨酸酶活性成分研究
　　通过HPLC法进行成分敲出试验，制备得到敲出化合物及其阴性样品，与原提取液同时进行体外酪氨酸酶活性测定，确定白芷酪氨酸酶活性相关成分及该成分与其他成分的相互作用。
　　共制备21个敲出化合物，高分辨质谱结果表明S24的敲出成分为水合氧化前胡素，S25的敲出成分为白当归素，S30的敲出成分为佛手柑内酯，S40的敲出成分为欧前胡素，S41的敲出成分为蛇床夫内酯，S42的敲出成分为异欧前胡素。当各样品的浓度为相当于原药材1g·mL-1时，S4、S6、S7、S23、S24、S28、S34-35、S37、S40、S41、S42的目标成分均对酪氨酸酶有抑制作用，其中S4、S7、S24的目标成分对酪氨酸酶的抑制作用较强；S8、S12、S19、S21、S25、S30、S31-32、S33、S38、S39的目标成分均对酪氨酸酶有激活作用，其中S12、S38的目标成分均对酪氨酸酶的激活作用较强。
　　S4、S7、S23、S24、S34-35、S37、S40、S42、S8、S12、S31-32、S33、S38、S25的目标成分与阴性样品之间存在拮抗作用；S6、S28、S19、S21、S30、S39、S41的目标成分与阴性样品之间存在协同作用。当样品浓度为相当于原药材1g·mL-1时，S6、S41的目标成分对酪氨酸酶的活性结果与“谱效关系”分析结果一致。
　　第四章、基于血清药理学的白芷对大鼠血清酪氨酸酶含量影响的研究
　　通过血清药理学方法考察不同加热条件处理的白芷水提液对大鼠酪氨酸酶含量的影响。制备白芷水提液，大鼠灌胃给药1.05g·kg-1，1次·d-1，共7d。末次给药1h后腹主动脉取血，室温下静置2-3h，3000rpm离心20min，取上层血清。通过大鼠酪氨酸酶试剂盒测定血清中酪氨酸酶含量。结果显示所有给药组的血清酪氨酸酶含量均高于空白组；除50℃-108h组血清酪氨酸酶含量低于生品组外，其余给药组的血清酪氨酸酶含量均高于生品组。说明白芷水提液可以提高大鼠血清酪氨酸酶的含量。

目录

声明

第一章 中药物质基础研究综述

1.1 前言

1.2 化学成分分离法

1.3 基于谱效关系的药效物质研究

1.4 基于成分敲出的药效物质研究

1.5 中药血清药物化学、血清药理学研究

1.6 代谢组学研究

1.7 结语

参考文献

本章小结

第二章 基于谱效关系的白芷酪氨酸酶活性成分研究

2.1 材料

2.2 试验方法

2.3 试验结果

2.4 讨论

参考文献

本章小结

第三章 基于成分敲出的白芷酪氨酸酶活性成分研究

3.1 材料

3.2 试验方法

3.3 试验结果

3.4 讨论

参考文献

本章小结

第四章 基于血清药理学的白芷对大鼠血清酪氨酸酶含量影响的研究

4.1 材料

4.2 试验方法

4.3 试验结果

4.4 讨论

参考文献

本章小结

结论

论文创新点

硕士期间发表论文

致谢