蛇床子素在家兔与大鼠体内的药代动力学研究

摘要

蛇床子为伞形科蛇床属植物蛇床Cnidiummonnieri(L.)Cuss的成熟干燥果实，《神农本草经》记载“具有温肾助阳、祛风、燥湿、杀虫之功效，用于阳痿、宫冷、不孕、寒湿带下、湿鼻腰痛；外治外阴湿疹，阴道炎”。民间外用方剂中也用于抗真菌、抗病毒、驱虫及治疗湿疹和阴道瘙痒等。蛇床子含有蛇床子素、异缬草酸龙脑酯、异龙脑、欧前胡素、蛇床定、佛手柑内酯、异茴香素(异虎耳草素)、花椒毒素、花椒毒酚及当归酸酯等多种活性成分，其中蛇床子素(osthole，ost)为其主要活性成分，含量最高约为0.8％，占总香豆素类的60％。80年代以来国内外关于蛇床子素的研究主要集中在药理作用方面，主要有降压作用、心脏抑制作用、学习记忆促进作用、还有性激素样作用、调节骨代谢、增强免疫力作用等等。 药物有效成分在体内如何吸收、分布、代谢、排泄对于药物的临床应用具有指导意义，而药物体内过程的研究是合理用药的前提条件。国内外关于蛇床子素的药代动力学研究较局限，本课题旨在进一步深入系统地研究蛇床子素在动物体内的代谢动力学、组织分布规律、排泄规律、血浆蛋白结合率、代谢产物以及对药物代谢酶的影响等，为蛇床子素进一步的临床试验提供了研究依据。本课题以反相高效液相色谱法作为检测手段，建立了新西兰白兔和大鼠血浆、组织、尿和粪中蛇床子素含量的测定方法。揭示了蛇床子素体内代谢类型、组织分布规律、排泄规律以及与血浆蛋白结合情况。 家兔体内的研究：三组家兔分别腹腔注射蛇床子素15，30和60mg·kg-1后不同时间点(5，10，20，25，30，35，45，55，60，75，90，110，125min)采血，去蛋白处理后，HPLC测定，所得药物浓度-时间数据用中国药理学会编制的3P97程序拟合。根据AIC最小，R2值最大的原则，获得最佳房室模型和药代动力学参数。大鼠体内的研究：两组大鼠分别腹腔注射蛇床子素30，120mg·kg-1后，6个时间点(5，10，20，60，90，120min)分别断头处死一组大鼠并收集全血，迅速取心、肝、脑、肺、肾、脾、睾丸、附睾各组织。各组织处理后HPLC测定药物含量。各组织平均药物含量-时间数据用3P97程序拟合，按非房室模型的统计矩法进行统计。 研究结果发现：家兔腹腔注射蛇床子素的药代动力学特点符合一级消除的一室开放模型，主要药代动力学参数(15、30和60mg·kg-1)分别为Cmax：0.67，1.70，3.57mg·L-1，消除半衰期：25.4，52.4，82.7min，AUC：62.73，147.98，306.64(mg·L-1·min)。以上各参数显示出明显的剂量依赖性；而MRT为60.1，60.6和50.9minCL/F(S)为0.11，0.29和0.22(L·min-1·kg-1)，未显示明显的剂量依赖性。大鼠腹腔注射蛇床子素的药代动力学特点也符合一级消除的一室开放模型，主要药代动力学参数(30，120mg·kg-1)分别为Cmax.：1.998，9.080μg·ml-1，消除半衰期：37.1，81.0min，AUC：96.166，739.187(mg·L-1·min)，MRT：45.3，50.3min。CL/F(S)：0.259，0.113(L·min-1·kg-1)。蛇床子素在大鼠体内吸收快，分布也快，给予30mg·kg-1的蛇床子素后，各个脏器可达到的药物浓度关系为肾＞脑＞肝脏＞附睾＞心脏＞肺＞脾，蛇床子素浓度分别为7.525，6.302，3.423，3.422，1.601，1.326，0.981μg·ml-1达峰时间分别为0.6，0.9，7.6，15.0，2.7，11.6，15.1min。给予120mg·kg-1的蛇床子素后，各组织可达到的最大药物浓度关系为脾＞肝脏＞肾＞睾丸＞心脏＞脑，蛇床子素浓度分别为35.558，18.874，11.008，9.073，5.923，1.449μg·ml-1，达峰时间分别为12.7，9.7，3.8，25.2，5.5，35.5min，蛇床子素在脑中的药物浓度在这八个器官中最低。脑缺血模型大鼠实验证明蛇床子素容易透过血-脑脊液屏障，三次给药后各个组织的药物含量关系为：肝脏＞肾＞脾＞心脏＞脑。体外平衡透析法研究蛇床子素在家兔血浆蛋白结合率，结果表明蛇床子素血浆蛋白结合率高达76％。 体外肝脏代谢实验表明肝药酶1h可以代谢掉78％的蛇床子素，蛇床子素主要经肝脏代谢，另外肾脏和肺也可能参与代谢。蛇床子素主要经肾脏排泄，体内还有胆汁排泄等其他的排泄方式。 总之，腹腔注射蛇床子素，家兔和大鼠体内药代动力学均符合一级消除的一室开放模型，吸收、分布和消除速度都很快，蛇床子素在大鼠体内分布广泛，尤其在血流丰富的肝脏，肾和脾等组织中分布速度较快，浓度较高；在脂肪含量高的附睾和睾丸组织中滞留时间较长。

目录

摘要

缩略语表

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 蛇床子素的药理作用研究进展

致谢

个人简历