糖皮质激素受体表达水平对激素治疗肺内、外源性ALI/ARDS疗效的影响

摘要

目的：急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是指由心源性以外的肺内外各种致病因素导致的急性进行性缺氧性呼吸衰竭。ALI/ARDS具有性质相同但程度不同的病理生理改变，严重的ALI或ALI的最终阶段被定义为ARDS。 ALI/ARDS的病因复杂，有100多种疾病可并发ARDS。临床上将其划分为肺内源性ARDS和肺外源性ARDS.前者包括：肺部感染、胃内容物吸入、吸入有毒气体等；后者包括：脓毒症、休克、严重的非胸部创伤和重症胰腺炎等。而临床上最常见的形式多见于脓毒症时的内毒素损害(约40％)，其次是胃内容物误吸引起的ALI/ARDS，占30％左右。因此，目前有关ALI/ARDS的实验研究多采用这两种致损伤模型，是符合临床情况的。 糖皮质激素(GCs)是由肾上腺皮质束状带分泌的重要类固醇类内分泌激素，有重要的生理作用。临床上，GCs是治疗ALI/ARDS较为普遍的用药。从理论上讲，GCs具有抑制炎症反应、减轻细胞因子对肺组织的损伤和抑制纤维化等作用，故用于治疗ALI/ARDS应收到很好的效果，但事实并非如此。长期以来，GCs在ALI/ARDS中的应用价值始终褒贬不一。然而，在大量的临床实践中，由于似乎总能从糖皮质激素治疗中受益，故GCs对ALI/ARDS的治疗作用一直受到不同程度的认可，但不同患者治疗效果差异较大，其原因有待进一步研究。 糖皮质激素受体(GR)是受体超家族中的重要成员，也是一种典型的激素依赖性核转录调控因子，调控多种基因转录的激活和抑制，在机体的生命活动中具有重要作用。由于GR是GCs生物学作用发挥的介导者，其表达水平和功能状态必将影响组织细胞对GCs的敏感性，从而影响GCs的治疗效果。许多研究指出用药前测定GR可以作为推测GCs治疗反应和确切治疗方案的一个指标。 临床上，人们发现GCs治疗不同病因的ALI/ARDS的效果存在不同，但对其潜在机理尚未阐明。近年来，国内外许多研究发现ALI/ARDS也存在GCs-GR系统紊乱现象，这对进一步探讨本病的发病机理与治疗效果的关系提供了重要依据。 因此，本研究复制了肺内、外源性两种病因的ALI/ARDS的动物模型，对照比较血清中糖皮质激素的水平，外周血单型核白细胞(PBMC)上GR表达水平及糖皮质激素干预后对其表达水平的影响。探讨糖皮质激素的作用机制及糖皮质激素受体的改变对疾病预后的影响，为临床上选择性应用糖皮质激素治疗不同病因的ALI提供理论上的依据。 方法：实验分组和模型复制：健康雄性SD大鼠96只随机分为6组：①生理盐水(NS)组：尾静脉注射生理盐水0.6ml②LPS组：经尾静脉注射LPS(8mg/kg)③HCl组：气管内缓慢滴注HCl(pH1.8，2ml/kg)④NS+Dex组，⑤LPS+Dex组，⑥HCl+Dex组。④、⑤、⑥三组为GCs干预组。模型复制前2天腹腔注射Dex2mg/kg，1次/天，模型复制前再注射一次，计3次。各项指标测定：模型复制成功后，收集标本，进行各项指标测定。外周血单个核细胞(PBMC)上的GR水平和血清GCs浓度测定：用密度梯度离心法将收集的肝素抗凝血中的外周血单个核细胞分离出来，并将细胞悬于RPMIl640培养基中，进行细胞计数调成所需细胞浓度。最后用灵敏度较高的3H—地塞米松(3H—DEX)放射性配体结合法测定GR水平。血清中的GCs浓度用放免法测定，按皮质醇放免试剂盒中的操作步骤进行。 病理组织学检查：观察模型复制后两种肺损伤模型肺组织标本的改变，然后进行肺组织病理切片，在显微镜下观察肺组织病理形态学改变并对其进行半定量评分。 结果：肺损伤生物学指标和光镜下肺组织病理评分等指标，HCl组和LPS组均高于NS组，而在两个肺损伤模型组的比较中，除BALF蛋白含量这一指标，HCl组显著高于LPS组以外，其它各项指标均无显著性差异。这些指标在LPS+Dex组均显著下降，而在HCl+Dex组，这些指标的变化却不一致，肺病理评分未有明显改善，肺损伤生物学三个指标的改善也均不如LPS+Dex组明显。 与NS组比较，HCl组GR表达水平显著下降，而LPS组虽有下降趋势，但差异无统计学意义。LPS+Dex组的GR表达水平与GCs均明显高于HCl+Dex组。Dex对LPS组和HCl组的GR表达水平均无明显影响，但二者的升降趋势是相反的；而对GCs浓度的影响二者均有显著性差异。 结论： 1.ALI/ARDS导致机体的应激反应，使GR表达减少，引起受体水平上的肾上腺皮质功能不全，这可能是肺损伤发生发展中的一个重要环节。 2.激素干预对这两个肺损伤模型的PBMC上的GR表达水平的影响不同，其机制可能与不同病因所致的ALI的发病机理不完全相同及GCs与GR的密切关系有关。 3.激素治疗肺内、外源性的ALI/ARDS的疗效不同，对LPS所致的肺损伤模型(肺外源性ALI/ARDS)的疗效好，对HCl吸入所致的肺损伤模型(肺内源性ALI/ARDS)的疗效差。这可能与GR的表达水平、功能状态及结构的改变(后二者都影响GR的亲和力)有关。

目录

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述糖皮质激素治疗急性肺损伤的疗效与其受体表达水平的关系

致谢

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